Gå til innholdet
L6565
Vev
Perifert blod

Dokumenter

L6565

Cell line · Produktnummer 305189

L6565-cellene ble fremstilt fra bukspyttkjertelsuspensjoner av miltceller fra L6565-leukemimus. Kromosomtallene varierte fra 38 til 144. Elektronmikroskopi...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

L6565-celler ble avledet fra bukspyttkjertelsuspensjoner av splenocytter fra L6565-leukemimus. Kromosomantallet varierte fra 38 til 144. Elektronmikroskopiske observasjoner viste at de klonale L6565-cellene hadde veldefinerte kjerner og en overflod av organeller og klasse A- og klasse C-viruspartikler i cytoplasmaet. Onkogenene c-myc og c-fos var overuttrykt i disse cellene. L6565-celleklonen er en RNA-virusholdig lymfoblastisk leukemi-stamcellelinje. Den har bestått mykoplasma-deteksjonstesten i dette biblioteket.

L6565-cellelinjen er viktig fordi den gir standardiserte eksperimentelle celleressurser og tilhørende teknisk støtte til forskning innen biovitenskap og bioteknologi. Disse cellene kan være avgjørende for å forstå de molekylære mekanismene ved leukemi, særlig den rollen viruspartikler og onkogenekspresjon spiller i leukemogenesen. I tillegg er de et verdifullt verktøy for testing og utvikling av legemidler, slik at forskere kan utforske potensielle behandlingsstrategier for leukemi og andre beslektede sykdommer

Vev
Perifert blod

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L6565 (Cytion-katalognummer 305189)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett mediet med 10 % FBS, 0,005 mg/ml insulin, 0,01 mg/ml humant transferrin, 0,1 mM etanolamin, 0,1 mM fosfoetanolamin, 25 nM selen, 500 nM hydrokortison, 0,005 mM forskolin, bovint hypofyseekstrakt (0,15 mg protein per ml)
Subkultivering
Homogeniser cellesuspensjonen i kolben forsiktig ved å pipettere opp og ned, og ta deretter en representativ prøve for å bestemme celletettheten per ml. Fortynn suspensjonen til en cellekonsentrasjon på 5 x 105 celler/ml med ferskt dyrkningsmedium, og fordel den justerte suspensjonen i nye kolber for videre dyrking.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.