Aller directement au contenu
BNL CL.2
Tissu
Foie
Synonymes
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Documents

BNL CL.2

Cell line · Référence du produit 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

BNL CL.2, une lignée de cellules hépatiques de souris dérivée à l'origine de cellules hépatiques embryonnaires BALB/c, joue un rôle important dans l'étude de la biologie cellulaire et des mécanismes moléculaires, en particulier en ce qui concerne le cycle cellulaire et sa régulation. Les chercheurs ont largement utilisé BNL CL.2 pour caractériser les complexes protéiques de la kinase cycline-dépendante (CDK) et étudier les altérations de ces complexes à la suite de transformations chimiques et virales. Cette lignée sert de progéniteur à diverses lignées cellulaires transformées telles que BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 et BNL SV A.8, toutes issues de BNL CL.2 et qui se sont révélées essentielles pour l'étude des altérations des CDK après transformation.

La BNL CL.2 se distingue par sa nature non tumorigène lorsqu'elle est testée sur des souris immunodéprimées et par son incapacité à croître indépendamment de l'ancrage, bien qu'elle ait la capacité de former des colonies dans des milieux semi-solides. Cela en fait un modèle inestimable pour l'exploration des processus et des transformations cellulaires dans un environnement contrôlé. En revanche, ses lignées dérivées, telles que celles transformées par l'époxyde de 3-méthylcholanthrène, le MNNG et le SV40, ont la capacité de se développer dans des géloses molles et de former des tumeurs chez des souris immunodéficientes, ce qui met en évidence l'impact des altérations génétiques et environnementales sur le comportement cellulaire. La lignée cellulaire BNL CL.2 et ses dérivés continuent à fournir une base solide pour la recherche sur la transformation cellulaire, la transfection cellulaire stable et les domaines connexes de la biologie cellulaire et moléculaire.

Tissu
Foie
Synonymes
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Non, les cellules n'étaient pas tumorigènes chez les souris immunodéprimées, mais elles formaient des colonies en milieu semi-solide.

04Identifiants

Référence
BNL CL.2 (numéro de catalogue Cytion 305177)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c
Âge du donneur
Embryon