Gå til innholdet
BNL CL.2
Vev
Lever
Synonymer
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Dokumenter

BNL CL.2

Cell line · Produktnummer 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

BNL CL.2, en muselevercellelinje som opprinnelig stammer fra BALB/c-embryonale leverceller, spiller en viktig rolle i studiet av cellebiologi og molekylære mekanismer, særlig når det gjelder cellesyklusen og reguleringen av denne. Forskere har brukt BNL CL.2 til å karakterisere cyclinavhengige kinase (CDK)-proteinkomplekser og undersøke endringene i disse kompleksene etter både kjemisk og viral transformasjon. Denne cellelinjen fungerer som stamfader for ulike transformerte cellelinjer som BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 og BNL SV A.8, som alle stammer fra BNL CL.2 og har vist seg å være avgjørende for å studere CDK-forandringer etter transformasjon.

BNL CL.2 skiller seg ut ved at den ikke er tumorogen når den testes i immunsupprimerte mus, og at den ikke kan vokse uavhengig av forankring, selv om den har evnen til å danne kolonier i halvfaste medier. Dette gjør den til en uvurderlig modell for utforskning av cellulære prosesser og transformasjoner i et kontrollert miljø. Derimot viser avledede linjer, som de som er transformert med 3-metylkolantren-epoksid, MNNG og SV40, at de kan vokse i myk agar og danne svulster i immundefekte mus, noe som understreker virkningen av genetiske og miljømessige endringer på cellenes atferd. BNL CL.2-cellelinjen og dens derivater fortsetter å utgjøre et robust grunnlag for forskning innen celletransformasjon, stabil celletransfeksjon og beslektede områder innen celle- og molekylærbiologi.

Vev
Lever
Synonymer
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Nei, cellene var ikke tumorogene i immunsupprimerte mus, men de dannet kolonier i halvfast medium.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BNL CL.2 (Cytion-katalognummer 305177)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
BALB/c
Donorens alder
Embryo