Премини към съдържанието
BNL CL.2
Тъкан
Черен дроб
Синоними
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Документи

BNL CL.2

Cell line · Номер на продукта 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

BNL CL.2, клетъчна линия за миши черен дроб, първоначално получена от ембрионални чернодробни клетки BALB/c, играе важна роля в изучаването на клетъчната биология и молекулярните механизми, особено по отношение на клетъчния цикъл и неговото регулиране. Изследователите са използвали широко BNL CL.2 за характеризиране на протеиновите комплекси на циклино-зависимата киназа (CDK) и за изследване на промените в тези комплекси след химическа и вирусна трансформация. Тази линия служи като предшественик за различни трансформирани клетъчни линии, като BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 и BNL SV A.8, които произхождат от BNL CL.2 и са се доказали като важни за изучаване на промените в CDK след трансформацията.

BNL CL.2 се отличава с нетуморогенния си характер, когато е тестван при имуносупресирани мишки, и с неспособността си да расте независимо от закотвянето, въпреки че притежава способността да образува колонии в полутвърда среда. Това го прави безценен модел за изследване на клетъчните процеси и трансформации в контролирана среда. За разлика от него производните му линии, като например тези, трансформирани с 3-метилхолантрен епоксид, MNNG и SV40, демонстрират способност да растат в мек агар и да образуват тумори при имунодефицитни мишки, подчертавайки влиянието на генетичните промени и промените в околната среда върху клетъчното поведение. Клетъчната линия BNL CL.2 и нейните производни продължават да осигуряват стабилна основа за изследвания в областта на клетъчната трансформация, стабилната клетъчна трансфекция и свързаните с нея области на клетъчната и молекулярната биология.

Тъкан
Черен дроб
Синоними
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Туморогенен
Не, клетките не са били туморогенни при имуносупресирани мишки, но са образували колонии в полутвърда среда.

04Идентификатори

Източник
BNL CL.2 (каталожен номер на Cytion 305177)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_4383

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
Ембрион