Siirry sisältöön
BNL CL.2
Kudos
Maksa
Synonyymit
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Asiakirjat

BNL CL.2

Cell line · Tuotenumero 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BNL CL.2 on hiiren maksasolulinja, joka on alun perin johdettu BALB/c-alkion maksasoluista, ja sillä on merkittävä rooli solubiologian ja molekyylimekanismien tutkimuksessa, erityisesti solusyklin ja sen säätelyn osalta. Tutkijat ovat käyttäneet BNL CL.2:ta laajalti sykliini-riippuvaisen kinaasin (CDK) proteiinikompleksien luonnehtimiseen ja näiden kompleksien muutosten tutkimiseen sekä kemiallisen että virustransformaation jälkeen. Tämä linja toimii esiasteena erilaisille muunnetuille solulinjoille, kuten BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 ja BNL SV A.8, jotka kaikki ovat peräisin BNL CL.2:sta ja jotka ovat osoittautuneet olennaisen tärkeiksi CDK:n muutosten tutkimisessa muunnoksen jälkeen.

BNL CL.2:lle on ominaista se, että se ei ole kasvainvaarallinen, kun sitä testattiin immunosuppressoiduilla hiirillä, ja se ei kykene kasvamaan ankkuroitumisriippumattomasti, vaikka se kykenee muodostamaan pesäkkeitä puolikiinteissä väliaineissa. Tämä tekee siitä korvaamattoman arvokkaan mallin soluprosessien ja -muutosten tutkimiseen kontrolloidussa ympäristössä. Sen sijaan sen johdannaislinjat, kuten 3-metyylikolantreeni epoksidin, MNNG:n ja SV40:n avulla muunnetut linjat, osoittavat kykyä kasvaa pehmeässä agarissa ja muodostaa kasvaimia immuunipuutteisissa hiirissä, mikä korostaa geneettisten ja ympäristömuutosten vaikutusta solujen käyttäytymiseen. BNL:n CL.2-solulinja ja sen johdannaiset tarjoavat edelleen vankan perustan solumuunnosten, vakaan solutransfektion ja niihin liittyvien solu- ja molekyylibiologian alojen tutkimukselle.

Kudos
Maksa
Synonyymit
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Ei, solut eivät olleet immunosuppressoitujen hiirten kasvaimia, mutta ne muodostivat pesäkkeitä puolikiinteässä väliaineessa.

04Tunnisteet

Lähdeviite
BNL CL.2 (Cytionin tuotenumero 305177)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c
Luovuttajan ikä
Alkio