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BNL CL.2
ティッシュ
肝臓
同義語
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

BNL CL.2

Cell line · 製品番号 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

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01概要

説明

BALB/c 胚性肝細胞に由来するマウス肝細胞株であるBNL CL.2は、細胞生物学と分子機構、特に細胞周期とその制御に関する研究において重要な役割を果たしている。研究者らはBNL CL.2を広く用いてサイクリン依存性キナーゼ(CDK)タンパク質複合体の特徴を明らかにし、化学形質転換やウイルス形質転換に伴うこれらの複合体の変化を調べてきた。この株は、BNL 1ME A.7R.1、BNL 1NG A.2、BNL SV A.8などの様々な形質転換細胞株の前駆細胞として機能しており、これらはすべてBNL CL.2を起源とし、形質転換後のCDK変化を研究するために不可欠であることが証明されている。

BNL CL.2は、免疫抑制マウスで試験した場合、非腫瘍原性であること、また、半固形培地中でコロニーを形成する能力を有するものの、アンカレッジ非依存的に増殖できないことが特徴である。このため、制御された環境での細胞過程や形質転換を調べるための貴重なモデルとなっている。対照的に、3-メチルコラントレンエポキシド、MNNG、SV40で形質転換された細胞株などの誘導体は、軟寒天培地で増殖し、免疫不全マウスで腫瘍を形成する能力を示し、遺伝的・環境的変化が細胞の挙動に与える影響を浮き彫りにしている。BNL CL.2細胞株とその誘導体は、細胞形質転換、安定した細胞トランスフェクション、および細胞生物学と分子生物学の関連分野における研究のための強固な基盤を提供し続けている。

ティッシュ
肝臓
同義語
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02分類

生物
マウス
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
腫瘍形成性
いいえ、この細胞は免疫抑制マウスでは腫瘍化しませんでしたが、半固形培地ではコロニーを形成しました。

04識別子

引用
BNL CL.2(Cytion カタログ番号 305177)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_4383

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

品種/亜種
BALB/c
ドナーの年齢
胚