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BNL CL.2
Gewebe
Leber
Synonyme
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

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BNL CL.2

Cell line · Artikelnummer 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

BNL CL.2, eine Leberzelllinie der Maus, die ursprünglich von embryonalen BALB/c-Leberzellen abstammt, spielt eine wichtige Rolle bei der Erforschung der Zellbiologie und der molekularen Mechanismen, insbesondere im Hinblick auf den Zellzyklus und dessen Regulierung. Forscher haben die BNL CL.2 ausgiebig genutzt, um die Proteinkomplexe der Cyclin-abhängigen Kinase (CDK) zu charakterisieren und die Veränderungen in diesen Komplexen nach chemischer und viraler Transformation zu untersuchen. Diese Linie dient als Vorläufer für verschiedene transformierte Zelllinien wie BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 und BNL SV A.8, die alle aus BNL CL.2 hervorgegangen sind und sich als wesentlich für die Untersuchung von CDK-Veränderungen nach einer Transformation erwiesen haben.

BNL CL.2 zeichnet sich dadurch aus, dass es bei Tests an immunsupprimierten Mäusen keine Tumore hervorruft und nicht verankerungsunabhängig wachsen kann, obwohl es die Fähigkeit besitzt, in halbfesten Medien Kolonien zu bilden. Dies macht ihn zu einem unschätzbaren Modell für die Erforschung zellulärer Prozesse und Transformationen in einer kontrollierten Umgebung. Im Gegensatz dazu zeigen ihre Derivatlinien, wie z. B. die mit 3-Methylcholanthrenepoxid, MNNG und SV40 transformierten, die Fähigkeit, in weichem Agar zu wachsen und in immundefizienten Mäusen Tumore zu bilden, was die Auswirkungen genetischer und umweltbedingter Veränderungen auf das zelluläre Verhalten deutlich macht. Die CL.2-Zelllinie des BNL und ihre Derivate bilden weiterhin eine solide Grundlage für die Forschung im Bereich der Zelltransformation, der stabilen Zelltransfektion und verwandter Bereiche der Zell- und Molekularbiologie.

Gewebe
Leber
Synonyme
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Nein, die Zellen waren in immunsupprimierten Mäusen nicht tumorerzeugend, bildeten aber in halbfestem Medium Kolonien.

04Bezeichner

Quellenangabe
BNL CL.2 (Cytion Katalognummer 305177)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
BALB/c
Alter des Spenders
Embryo