İçeriğe atla
BNL CL.2
Doku
Karaciğer
Eş anlamlılar
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

BNL CL.2

Cell line · Ürün numarası 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Orijinal olarak BALB/c embriyonik karaciğer hücrelerinden türetilen bir fare karaciğer hücre hattı olan BNL CL.2, özellikle hücre döngüsü ve düzenlenmesi ile ilgili olarak hücresel biyoloji ve moleküler mekanizmaların incelenmesinde önemli bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar, sikline bağımlı kinaz (CDK) protein komplekslerini karakterize etmek ve hem kimyasal hem de viral dönüşümü takiben bu komplekslerdeki değişiklikleri araştırmak için BNL CL.2'yi kapsamlı bir şekilde kullanmışlardır. Bu hat, BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 ve BNL SV A.8 gibi hepsi BNL CL.2'den kaynaklanan ve dönüşüm sonrası CDK değişikliklerini incelemek için gerekli olduğu kanıtlanmış çeşitli dönüştürülmüş hücre hatları için bir progenitör görevi görmektedir.

BNL CL.2, bağışıklığı baskılanmış farelerde test edildiğinde tümörijenik olmayan doğası ve yarı katı ortamda koloniler oluşturma kabiliyetine sahip olmasına rağmen ankrajdan bağımsız olarak büyüyememesi ile ayırt edilir. Bu da onu kontrollü bir ortamda hücresel süreçleri ve dönüşümleri keşfetmek için paha biçilmez bir model haline getirmektedir. Buna karşılık, 3-Metilkolantren epoksit, MNNG ve SV40 tarafından dönüştürülenler gibi türev hatları, yumuşak agarda büyüme ve immün yetmezliği olan farelerde tümör oluşturma yeteneğini göstererek genetik ve çevresel değişikliklerin hücresel davranış üzerindeki etkisini vurgulamaktadır. BNL CL.2 hücre hattı ve türevleri, hücresel transformasyon, stabil hücre transfeksiyonu ve ilgili hücresel ve moleküler biyoloji alanlarındaki araştırmalar için sağlam bir temel sağlamaya devam etmektedir.

Doku
Karaciğer
Eş anlamlılar
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Hayır, hücreler bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümörijenik değildi, ancak yarı katı ortamda koloniler oluşturdu.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
BNL CL.2 (Cytion katalog numarası 305177)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
Embriyo