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BNL CL.2
Pañuelo de papel
Hígado
Sinónimos
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

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BNL CL.2

Cell line · Número de producto 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

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01Información general

Descripción

BNL CL.2, una línea celular hepática de ratón derivada originalmente de células hepáticas embrionarias BALB/c, desempeña un papel importante en el estudio de la biología celular y los mecanismos moleculares, especialmente en lo que respecta al ciclo celular y su regulación. Los investigadores han utilizado ampliamente BNL CL.2 para caracterizar los complejos proteicos de la quinasa dependiente de ciclina (CDK) e investigar las alteraciones de estos complejos tras una transformación tanto química como vírica. Esta línea sirve de progenitora para varias líneas celulares transformadas, como BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 y BNL SV A.8, todas ellas originadas a partir de BNL CL.2 y que han demostrado ser esenciales para estudiar las alteraciones de CDK tras la transformación.

El BNL CL.2 se distingue por su naturaleza no tumorigénica cuando se prueba en ratones inmunodeprimidos, y por su incapacidad para crecer de forma independiente del anclaje, aunque posee la capacidad de formar colonias en medios semisólidos. Esto la convierte en un modelo inestimable para explorar procesos y transformaciones celulares en un entorno controlado. En cambio, sus líneas derivadas, como las transformadas por epóxido de 3-metilcolantreno, MNNG y SV40, demuestran la capacidad de crecer en agar blando y formar tumores en ratones inmunodeficientes, lo que pone de relieve el impacto de las alteraciones genéticas y ambientales en el comportamiento celular. La línea celular CL.2 del BNL y sus derivados siguen proporcionando una base sólida para la investigación en transformación celular, transfección celular estable y campos relacionados de la biología celular y molecular.

Pañuelo de papel
Hígado
Sinónimos
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Clasificación

Organismo
Ratón
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tumorigénico
No, las células no fueron tumorigénicas en ratones inmunodeprimidos, pero sí formaron colonias en medio semisólido.

04Identificadores

Referencia
BNL CL.2 (número de catálogo de Cytion 305177)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Raza / subespecie
BALB/c
Edad del donante
Embrión