Preskoči na vsebino
BNL CL.2
Tkivo
Jetra
Sinonimi
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Dokumenti

BNL CL.2

Cell line · Številka izdelka 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

BNL CL.2, mišja jetrna celična linija, prvotno pridobljena iz embrionalnih jetrnih celic BALB/c, ima pomembno vlogo pri preučevanju celične biologije in molekularnih mehanizmov, zlasti glede celičnega cikla in njegove regulacije. Raziskovalci so v veliki meri uporabljali BNL CL.2 za karakterizacijo beljakovinskih kompleksov ciklinsko odvisne kinaze (CDK) in preučevanje sprememb v teh kompleksih po kemični in virusni transformaciji. Ta linija služi kot predstopnja za različne transformirane celične linije, kot so BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 in BNL SV A.8, ki izvirajo iz BNL CL.2 in so se izkazale za bistvene pri preučevanju sprememb CDK po transformaciji.

BNL CL.2 se odlikuje po tem, da pri testiranju na imunosuprimiranih miših ni tumorigen in da ne more rasti neodvisno od sidrišča, čeprav je sposoben tvoriti kolonije v poltrdnih medijih. Zato je neprecenljiv model za raziskovanje celičnih procesov in transformacij v nadzorovanem okolju. Nasprotno pa so njegove izpeljanke, kot so linije, transformirane s 3-metilholantren epoksidom, MNNG in SV40, sposobne rasti v mehkem agarju in tvoriti tumorje pri imunsko pomanjkljivih miših, kar poudarja vpliv genetskih in okoljskih sprememb na obnašanje celic. Celična linija BNL CL.2 in njeni derivati še naprej zagotavljajo trdno podlago za raziskave na področju celične transformacije, stabilne transfekcije celic in sorodnih področij celične in molekularne biologije.

Tkivo
Jetra
Sinonimi
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Ne, celice pri imunosuprimiranih miših niso bile tumorogene, vendar so tvorile kolonije v poltrdnem gojišču.

04Identifikatorji

Navajanje vira
BNL CL.2 (kataloška številka Cytion 305177)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
Zarodek