Μετάβαση στο περιεχόμενο
BNL CL.2
Ιστός
Ήπαρ
Συνώνυμα
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Έγγραφα

BNL CL.2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η BNL CL.2, μια σειρά ηπατικών κυττάρων ποντικού που προέρχεται αρχικά από εμβρυϊκά ηπατικά κύτταρα BALB/c, διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στη μελέτη της κυτταρικής βιολογίας και των μοριακών μηχανισμών, ιδίως όσον αφορά τον κυτταρικό κύκλο και τη ρύθμισή του. Οι ερευνητές έχουν χρησιμοποιήσει εκτενώς το BNL CL.2 για να χαρακτηρίσουν τα πρωτεϊνικά σύμπλοκα της κυκλινοεξαρτώμενης κινάσης (CDK) και να διερευνήσουν τις μεταβολές σε αυτά τα σύμπλοκα μετά από χημικό και ιογενή μετασχηματισμό. Η γραμμή αυτή χρησιμεύει ως πρόγονος για διάφορες μετασχηματισμένες κυτταρικές σειρές, όπως οι BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 και BNL SV A.8, οι οποίες προέρχονται από την BNL CL.2 και έχουν αποδειχθεί απαραίτητες για τη μελέτη των μεταβολών της CDK μετά το μετασχηματισμό.

Το BNL CL.2 διακρίνεται από τη μη καρκινογόνο φύση του, όταν δοκιμάστηκε σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια, και την αδυναμία του να αναπτύσσεται ανεξάρτητα από την αγκύρωση, αν και διαθέτει την ικανότητα να σχηματίζει αποικίες σε ημιστερεά μέσα. Αυτό το καθιστά ανεκτίμητο μοντέλο για τη διερεύνηση κυτταρικών διεργασιών και μετασχηματισμών σε ελεγχόμενο περιβάλλον. Αντίθετα, οι παράγωγες σειρές του, όπως αυτές που έχουν μετασχηματιστεί από το εποξείδιο του 3-μεθυλοχολάνθρακα, το MNNG και το SV40, επιδεικνύουν την ικανότητα να αναπτύσσονται σε μαλακό άγαρ και να σχηματίζουν όγκους σε ανοσοανεπαρκή ποντίκια, αναδεικνύοντας την επίδραση των γενετικών και περιβαλλοντικών μεταβολών στην κυτταρική συμπεριφορά. Η κυτταρική σειρά CL.2 της BNL και τα παράγωγά της συνεχίζουν να παρέχουν μια ισχυρή βάση για την έρευνα στον κυτταρικό μετασχηματισμό, τη σταθερή κυτταρική διαμόλυνση και τους συναφείς τομείς της κυτταρικής και μοριακής βιολογίας.

Ιστός
Ήπαρ
Συνώνυμα
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Ογκογόνος
Όχι, τα κύτταρα δεν ήταν καρκινικά σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια, αλλά σχημάτισαν αποικίες σε ημιστερεό μέσο.

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
BNL CL.2 (αριθμός καταλόγου Cytion 305177)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_4383

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c
Ηλικία δωρητή
Έμβρυο