Tartalomra ugrás
BNL CL.2
Szövet
Máj
Szinonimák
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Dokumentumok

BNL CL.2

Cell line · Termékszám 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BNL CL.2, egy eredetileg BALB/c embrionális májsejtekből származó egér májsejtvonal, jelentős szerepet játszik a sejtbiológia és a molekuláris mechanizmusok tanulmányozásában, különösen a sejtciklus és annak szabályozása tekintetében. A kutatók széles körben használták a BNL CL.2-t a ciklinfüggő kináz (CDK) fehérjekomplexek jellemzésére, valamint e komplexek kémiai és vírusos transzformációt követő változásainak vizsgálatára. Ez a vonal különböző transzformált sejtvonalak, például a BNL 1ME A.7R.1, a BNL 1NG A.2 és a BNL SV A.8 elődjeként szolgál, amelyek mind a BNL CL.2-ből származnak, és alapvető fontosságúnak bizonyultak a transzformáció utáni CDK-változások tanulmányozásához.

A BNL CL.2-t az különbözteti meg, hogy immunszupprimált egereken vizsgálva nem tumorogén jellegű, és nem képes a lehorgonyzástól független növekedésre, bár rendelkezik azzal a képességgel, hogy félszilárd táptalajon kolóniákat képezzen. Ez teszi felbecsülhetetlen értékű modellé a sejtfolyamatok és átalakulások kontrollált környezetben történő vizsgálatához. Ezzel szemben származékos vonalai, például a 3-metil-kolantrén-epoxiddal, MNNG-vel és SV40-gyel transzformált vonalak bizonyítják, hogy képesek lágy agarban növekedni és tumorokat képezni immunhiányos egerekben, rávilágítva a genetikai és környezeti változások sejtek viselkedésére gyakorolt hatására. A BNL CL.2 sejtvonal és származékai továbbra is szilárd alapot biztosítanak a sejtek átalakulásának, a stabil sejtek transzfekciójának és a sejt- és molekuláris biológia kapcsolódó területeinek kutatásához.

Szövet
Máj
Szinonimák
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Nem, a sejtek immunszupprimált egerekben nem voltak tumorogének, de félszilárd táptalajon kolóniákat képeztek.

04Azonosítók

Hivatkozás
BNL CL.2 (Cytion katalógusszám: 305177)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
Embrió