Prejsť na obsah
BNL CL.2
Tkanivo
Pečeň
Synonymá
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Dokumenty

BNL CL.2

Cell line · Číslo výrobku 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

BNL CL.2, línia myších pečeňových buniek pôvodne odvodená z embryonálnych pečeňových buniek BALB/c, zohráva významnú úlohu pri štúdiu bunkovej biológie a molekulárnych mechanizmov, najmä pokiaľ ide o bunkový cyklus a jeho reguláciu. Výskumníci vo veľkej miere využívali BNL CL.2 na charakterizáciu proteínových komplexov cyklín-dependentnej kinázy (CDK) a skúmali zmeny v týchto komplexoch po chemickej aj vírusovej transformácii. Táto línia slúži ako progenitor pre rôzne transformované bunkové línie, ako napríklad BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 a BNL SV A.8, ktoré všetky pochádzajú z BNL CL.2 a ukázali sa ako nevyhnutné na štúdium zmien CDK po transformácii.

BNL CL.2 sa vyznačuje tým, že pri testovaní na imunosuprimovaných myšiach nie je tumorogénna a nie je schopná rásť nezávisle od ukotvenia, hoci má schopnosť vytvárať kolónie v polotuhých médiách. To z nej robí neoceniteľný model na skúmanie bunkových procesov a transformácií v kontrolovanom prostredí. Naopak, jej odvodené línie, ako napríklad línie transformované 3-metylcholantrén epoxidom, MNNG a SV40, vykazujú schopnosť rásť v mäkkom agare a tvoriť nádory u imunodeficientných myší, čo poukazuje na vplyv genetických a environmentálnych zmien na správanie buniek. Bunková línia BNL CL.2 a jej deriváty naďalej poskytujú spoľahlivý základ pre výskum v oblasti bunkovej transformácie, stabilnej transfekcie buniek a v súvisiacich oblastiach bunkovej a molekulárnej biológie.

Tkanivo
Pečeň
Synonymá
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Tumorigenický
Nie, bunky neboli u imunosuprimovaných myší nádorové, ale vytvárali kolónie v polotuhom médiu.

04Identifikátory

Citácia
BNL CL.2 (katalógové číslo Cytion 305177)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
BALB/c
Vek darcu
Embryo