Mine otse sisu juurde
BNL CL.2
Kude
Maksa
Sünonüümid
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Dokumendid

BNL CL.2

Cell line · Toote number 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BNL CL.2, hiire maksarakkude liin, mis on algselt saadud BALB/c embrüonaalsetest maksarakkudest, mängib olulist rolli rakubioloogia ja molekulaarmehhanismide uurimisel, eriti rakutsükli ja selle reguleerimise osas. Teadlased on ulatuslikult kasutanud BNL CL.2-d, et iseloomustada tsükliinist sõltuva kinaasi (CDK) valgukomplekse ja uurida nende komplekside muutusi nii keemilise kui ka viirusliku transformatsiooni tagajärjel. See liin on eelkäijaks erinevatele transformeeritud rakuliinidele, nagu BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 ja BNL SV A.8, mis kõik pärinevad BNL CL.2-st ja on osutunud oluliseks CDK muutuste uurimiseks pärast transformeerimist.

BNL CL.2 eristub immunosupressiivsetel hiirtel testides selle mittetuumoriseeriva iseloomu poolest ning võimetusest kasvada ankurdumisvastaselt, kuigi tal on võime moodustada kolooniaid poolkindlal söötmel. See muudab selle hindamatuks mudeliks rakuprotsesside ja muundumiste uurimiseks kontrollitud keskkonnas. Seevastu tema tuletatud liinid, näiteks 3-metüülkolantreenepoksiidiga, MNNG-ga ja SV40-ga transformeeritud liinid, näitavad võimet kasvada pehmel agaril ja moodustada immuunpuudulikkusega hiirtel kasvajaid, tuues esile geneetiliste ja keskkonna muutuste mõju rakkude käitumisele. BNL CL.2 rakuliin ja selle derivaadid pakuvad jätkuvalt tugevat alust rakutransformatsiooni, stabiilse rakutransfektsiooni ja sellega seotud raku- ja molekulaarbioloogia alaste uuringute jaoks.

Kude
Maksa
Sünonüümid
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Ei, rakud ei olnud immunosupresseeritud hiirtel kasvajalised, kuid moodustasid poolkindlas keskkonnas kolooniaid.

04Tunnused

Viide
BNL CL.2 (Cytioni katalooginumber 305177)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Embrüo