Ga naar de inhoud
BNL CL.2
Weefsel
Lever
Synoniemen
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Documenten

BNL CL.2

Cell line · Productnummer 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

BNL CL.2, een levercellijn van muizen die oorspronkelijk is afgeleid van BALB/c embryonale levercellen, speelt een belangrijke rol in de studie van celbiologie en moleculaire mechanismen, vooral met betrekking tot de celcyclus en de regulatie daarvan. Onderzoekers hebben BNL CL.2 uitgebreid gebruikt om eiwitcomplexen van cycline-afhankelijke kinase (CDK) te karakteriseren en de veranderingen in deze complexen na chemische en virale transformatie te onderzoeken. Deze lijn dient als progenitor voor verschillende getransformeerde cellijnen zoals BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 en BNL SV A.8, die allemaal voortkomen uit BNL CL.2 en essentieel zijn gebleken voor het bestuderen van CDK-veranderingen na transformatie.

BNL CL.2 onderscheidt zich door zijn niet-tumorigene aard bij tests in immuunsuppressieve muizen en zijn onvermogen om ankerplaatsonafhankelijk te groeien, hoewel het wel in staat is om kolonies te vormen in halfvaste media. Hierdoor is het een model van onschatbare waarde voor het onderzoeken van cellulaire processen en transformaties in een gecontroleerde omgeving. Daarentegen laten afgeleide lijnen zoals die getransformeerd door 3-Methylcholantreen epoxide, MNNG en SV40 zien dat ze kunnen groeien in zachte agar en tumoren kunnen vormen in immuundeficiënte muizen, wat de impact van genetische en omgevingsveranderingen op cellulair gedrag benadrukt. De BNL CL.2 cellijn en zijn derivaten blijven een robuuste basis vormen voor onderzoek naar cellulaire transformatie, stabiele celtransfectie en verwante gebieden van cellulaire en moleculaire biologie.

Weefsel
Lever
Synoniemen
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Tumorverwekkend
Nee, de cellen waren niet tumorigeen in immuunsuppressieve muizen, maar vormden wel kolonies in een halfvast medium.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
BNL CL.2 (Cytion catalogusnummer 305177)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
Embryo