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HCC827-Luc
Tissu
Poumon
Maladie
Adénocarcinome pulmonaire

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HCC827-Luc

Cell line · Référence du produit 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

HCC827-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine HCC827 d'adénocarcinome pulmonaire, modifiée pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale HCC827 a été établie à partir d’un adénocarcinome pulmonaire et se caractérise par la présence d’une délétion activatrice de l’exon 19 de l’EGFR (del E746-A750), qui lui confère une forte sensibilité aux inhibiteurs de la tyrosine kinase de l’EGFR (TKI) tels que le géfitinib, l’erlotinib et l’osimertinib. La lignée HCC827 est donc l’un des modèles précliniques les plus largement utilisés pour étudier la biologie du cancer du poumon induit par l’EGFR, les mécanismes de résistance acquise aux TKI et l’efficacité des thérapies ciblées de nouvelle génération.

L’intégration stable de la luciférase dans la lignée HCC827-Luc permet une imagerie par bioluminescence (BLI) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de tumeurs pulmonaires xénogreffées et orthotopiques chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe tumorale, de la cinétique de croissance, de la dissémination métastatique et de la réponse thérapeutique. Cela rend la lignée HCC827-Luc particulièrement adaptée à l’évaluation de l’efficacité des agents ciblant l’EGFR, des thérapies combinées et des stratégies de renversement de la résistance dans des contextes précliniques in vivo.

HCC827-Luc conserve les principales caractéristiques moléculaires et phénotypiques de la lignée parentale HCC827, notamment la présence d’une délétion de l’exon 19 de l’EGFR et la sensibilité aux inhibiteurs de l’EGFR approuvés. La modification par la luciférase améliore considérablement la sensibilité et le débit des expériences, permettant des évaluations pharmacodynamiques en temps réel et facilitant à la fois le criblage à haut débit de médicaments et les études mécanistiques de la biologie de la voie de l’EGFR. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le statut mutationnel de l’EGFR et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études d’imagerie quantitative ou pharmacologiques.

Tissu
Poumon
Maladie
Adénocarcinome pulmonaire

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
HCC827-Luc (référence Cytion 305670)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase : 10 minutes à 37 °C
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
1 à 3 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
39 ans
Origine ethnique
Asiatique