Mine otse sisu juurde
HCC827-Luc
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu adenokartsinoom

Dokumendid

HCC827-Luc

Cell line · Toote number 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC827-Luc on inimese HCC827 kopsu adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud tuletikk-luciferase reportergeeni stabiilseks ekspresseerimiseks. Algrakuliin HCC827 loodi kopsu adenokartsinoomi põhjal ning selle eripäraks on aktiveeriv EGFR-i eksoni 19 deleetsioon (del E746-A750), mis annab rakule kõrge tundlikkuse EGFR-i türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI-de) suhtes, nagu gefitiniib, erlotiniib ja osimertiniib. Seetõttu on HCC827 üks laialdasemalt kasutatavaid prekliinilisi mudeleid EGFR-i poolt põhjustatud kopsuvähi bioloogia, omandatud TKI-resistentsuse mehhanismide ning järgmise põlvkonna sihtterapiate efektiivsuse uurimiseks.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon HCC827-Luc-is võimaldab immuunpuudulikkusega peremeesorganismides ksenotransplantaadi- ja ortotopilistes kopsuvähi mudelites kasvajakoormuse tundlikku ja kvantitatiivset bioluminestsentskuvamist (BLI). Kiirgav luminestsentssignaal korreleerub elujõuliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvajate juurdumise, kasvukineetika, metastaatilise leviku ja ravivastuse mitteinvasiivset pikaajalist jälgimist. See teeb HCC827-Luc-i eriti sobivaks EGFR-ile suunatud ravimite, kombinatsioonravi ja resistentsuse ületamise strateegiate tõhususe hindamiseks prekliinilistes in vivo tingimustes.

HCC827-Luc säilitab emaliini HCC827 peamised molekulaarsed ja fenotüübilised omadused, sealhulgas EGFR-i eksoni 19 deleetsiooni olemasolu ja tundlikkuse heakskiidetud EGFR-inhibiitorite suhtes. Lusiferaasi modifikatsioon suurendab oluliselt eksperimendi tundlikkust ja läbilaskevõimet, võimaldades reaalajas farmakodünaamilisi hindamisi ning hõlbustades nii suure läbilaskevõimega ravimite sõelumist kui ka EGFR-signaalitee bioloogia mehhanismide uurimist. Enne kasutamist kvantitatiivses pildistamises või farmakoloogilistes uuringutes peaksid teadlased oma konkreetsetes katsetingimustes kontrollima lusiferaasi aktiivsust, EGFR-mutatsiooni olemasolu ja kasvukineetikat.

Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
HCC827-Luc (Cytioni katalooginumber 305670)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase 10 minutit 37 °C juures
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
39 aastat
Etniline kuuluvus
Aasia