HCC827-Luc
Cell line · Numer produktu 305670
HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...
Dostosowanie / Zalecenia
- HCC827-LucCell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
HCC827-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej HCC827 pochodzącej z gruczolakoraka płuca, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa HCC827 została wyhodowana z gruczolakoraka płuca i charakteryzuje się obecnością aktywującej delecji w eksonie 19 receptora EGFR (del E746-A750), która nadaje jej wysoką wrażliwość na inhibitory kinazy tyrozynowej EGFR (TKI), takie jak gefitynib, erlotynib oraz osimertynib. HCC827 jest zatem jednym z najczęściej stosowanych modeli przedklinicznych do badania biologii raka płuca wywołanego przez EGFR, mechanizmów nabytej oporności na TKI oraz skuteczności terapii celowanych nowej generacji.
Stabilna integracja lucyferazy w linii HCC827-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach nowotworów płuc opartych na przeszczepach heterogenicznych i ortotopicznych u gospodarzy z obniżoną odpornością. Emitowany sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, umożliwiając nieinwazyjne monitorowanie w czasie długoterminowym wszczepienia nowotworu, kinetyki wzrostu, rozprzestrzeniania się przerzutów oraz odpowiedzi na leczenie. Dzięki temu linia HCC827-Luc nadaje się szczególnie do oceny skuteczności leków ukierunkowanych na EGFR, terapii skojarzonych oraz strategii odwracania oporności w przedklinicznych warunkach in vivo.
HCC827-Luc zachowuje kluczowe cechy molekularne i fenotypowe macierzystej linii HCC827, w tym status delecji eksonu 19 EGFR oraz wrażliwość na zatwierdzone inhibitory EGFR. Modyfikacja lucyferazowa znacznie zwiększa czułość eksperymentalną i przepustowość, umożliwiając ocenę farmakodynamiczną w czasie rzeczywistym oraz ułatwiając zarówno wysokoprzepustowe badania przesiewowe leków, jak i badania mechanistyczne biologii szlaku EGFR. Przed zastosowaniem w badaniach obrazowania ilościowego lub badaniach farmakologicznych naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, status mutacji EGFR oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.
- Chusteczka
- Płuco
- Choroba
- Gruczolakorak płuc
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Nabłonek
04Identyfikatory
- Źródło
- HCC827-Luc (numer katalogowy Cytion 305670)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2063
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase – 10 minut w temperaturze 37°C
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- 1 do 3 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 39 lat
- Pochodzenie etniczne
- Azjatycki
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
