Przejdź do treści
HCC827-Luc
Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak płuc

Dokumenty

HCC827-Luc

Cell line · Numer produktu 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

HCC827-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej HCC827 pochodzącej z gruczolakoraka płuca, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa HCC827 została wyhodowana z gruczolakoraka płuca i charakteryzuje się obecnością aktywującej delecji w eksonie 19 receptora EGFR (del E746-A750), która nadaje jej wysoką wrażliwość na inhibitory kinazy tyrozynowej EGFR (TKI), takie jak gefitynib, erlotynib oraz osimertynib. HCC827 jest zatem jednym z najczęściej stosowanych modeli przedklinicznych do badania biologii raka płuca wywołanego przez EGFR, mechanizmów nabytej oporności na TKI oraz skuteczności terapii celowanych nowej generacji.

Stabilna integracja lucyferazy w linii HCC827-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach nowotworów płuc opartych na przeszczepach heterogenicznych i ortotopicznych u gospodarzy z obniżoną odpornością. Emitowany sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, umożliwiając nieinwazyjne monitorowanie w czasie długoterminowym wszczepienia nowotworu, kinetyki wzrostu, rozprzestrzeniania się przerzutów oraz odpowiedzi na leczenie. Dzięki temu linia HCC827-Luc nadaje się szczególnie do oceny skuteczności leków ukierunkowanych na EGFR, terapii skojarzonych oraz strategii odwracania oporności w przedklinicznych warunkach in vivo.

HCC827-Luc zachowuje kluczowe cechy molekularne i fenotypowe macierzystej linii HCC827, w tym status delecji eksonu 19 EGFR oraz wrażliwość na zatwierdzone inhibitory EGFR. Modyfikacja lucyferazowa znacznie zwiększa czułość eksperymentalną i przepustowość, umożliwiając ocenę farmakodynamiczną w czasie rzeczywistym oraz ułatwiając zarówno wysokoprzepustowe badania przesiewowe leków, jak i badania mechanistyczne biologii szlaku EGFR. Przed zastosowaniem w badaniach obrazowania ilościowego lub badaniach farmakologicznych naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, status mutacji EGFR oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak płuc

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
HCC827-Luc (numer katalogowy Cytion 305670)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase – 10 minut w temperaturze 37°C
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
39 lat
Pochodzenie etniczne
Azjatycki