HCC827-Luc
Cell line · Preces numurs 305670
HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HCC827-LucCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HCC827-Luc ir cilvēka plaušu adenokarcinomas šūnu līnijas HCC827 bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā HCC827 šūnu līnija tika izveidota no plaušu adenokarcinomas un izceļas ar aktivējošu EGFR 19. eksona deleciju (del E746-A750), kas nodrošina augstu jutību pret EGFR tirozīna kināzes inhibitoriem (TKI), piemēram, gefitinibu, erlotinibu un osimertinibu. Tādējādi HCC827 ir viens no visplašāk izmantotajiem pirmsklīniskajiem modeļiem, lai pētītu EGFR izraisītā plaušu vēža bioloģiju, iegūtās TKI rezistences mehānismus un nākamās paaudzes mērķtiecīgo terapiju efektivitāti.
Stabila luciferāzes integrācija HCC827-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), lai novērtētu audzēja apjomu ksenotransplantātu un ortotopiskos plaušu audzēja modeļos imūndeficītiem saņēmējiem. Izstarotais luminescences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, tādējādi atbalstot neinvazīvu audzēja implantācijas, augšanas kinētikas, metastāžu izplatības un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērošanu. Tādēļ HCC827-Luc ir īpaši piemērots EGFR mērķtiecīgo līdzekļu, kombinēto terapiju un rezistences atgriešanas stratēģiju efektivitātes novērtēšanai pirmsklīniskos in vivo apstākļos.
HCC827-Luc saglabā vecāklīnijas HCC827 galvenās molekulārās un fenotipiskās īpašības, tostarp EGFR 19. eksona delecijas statusu un jutību pret apstiprinātiem EGFR inhibitoriem. Luciferāzes modifikācija ievērojami uzlabo eksperimentālo jutību un caurlaidspēju, ļaujot veikt farmakodinamiskus novērtējumus reālajā laikā un atvieglojot gan augstas caurlaidspējas zāļu skrīningu, gan EGFR signālceļa bioloģijas mehānismu izpēti. Pētniekiem pirms izmantošanas kvantitatīvajā attēlveidošanā vai farmakoloģiskajos pētījumos ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, EGFR mutāciju statuss un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.
- Audums
- Plaušas
- Slimība
- Plaušu adenokarcinoma
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
04Identifikatori
- Atsauce
- HCC827-Luc (Cytion kataloga numurs 305670)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2063
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase 10 minūtes 37 °C temperatūrā
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 39 gadi
- Etniskā piederība
- Āzijas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
