Pāriet uz saturu
HCC827-Luc
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma

Dokumenti

HCC827-Luc

Cell line · Preces numurs 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC827-Luc ir cilvēka plaušu adenokarcinomas šūnu līnijas HCC827 bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā HCC827 šūnu līnija tika izveidota no plaušu adenokarcinomas un izceļas ar aktivējošu EGFR 19. eksona deleciju (del E746-A750), kas nodrošina augstu jutību pret EGFR tirozīna kināzes inhibitoriem (TKI), piemēram, gefitinibu, erlotinibu un osimertinibu. Tādējādi HCC827 ir viens no visplašāk izmantotajiem pirmsklīniskajiem modeļiem, lai pētītu EGFR izraisītā plaušu vēža bioloģiju, iegūtās TKI rezistences mehānismus un nākamās paaudzes mērķtiecīgo terapiju efektivitāti.

Stabila luciferāzes integrācija HCC827-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), lai novērtētu audzēja apjomu ksenotransplantātu un ortotopiskos plaušu audzēja modeļos imūndeficītiem saņēmējiem. Izstarotais luminescences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, tādējādi atbalstot neinvazīvu audzēja implantācijas, augšanas kinētikas, metastāžu izplatības un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērošanu. Tādēļ HCC827-Luc ir īpaši piemērots EGFR mērķtiecīgo līdzekļu, kombinēto terapiju un rezistences atgriešanas stratēģiju efektivitātes novērtēšanai pirmsklīniskos in vivo apstākļos.

HCC827-Luc saglabā vecāklīnijas HCC827 galvenās molekulārās un fenotipiskās īpašības, tostarp EGFR 19. eksona delecijas statusu un jutību pret apstiprinātiem EGFR inhibitoriem. Luciferāzes modifikācija ievērojami uzlabo eksperimentālo jutību un caurlaidspēju, ļaujot veikt farmakodinamiskus novērtējumus reālajā laikā un atvieglojot gan augstas caurlaidspējas zāļu skrīningu, gan EGFR signālceļa bioloģijas mehānismu izpēti. Pētniekiem pirms izmantošanas kvantitatīvajā attēlveidošanā vai farmakoloģiskajos pētījumos ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, EGFR mutāciju statuss un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HCC827-Luc (Cytion kataloga numurs 305670)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase 10 minūtes 37 °C temperatūrā
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
39 gadi
Etniskā piederība
Āzijas