Gå direkte til indholdet
HCC827-Luc
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom i lungerne

Dokumenter

HCC827-Luc

Cell line · Varenummer 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCC827-Luc er et bioluminescerende derivat af den humane HCC827-lungeadenokarcinom-cellelinje, der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke et reportergen baseret på ildflue-luciferase. Den oprindelige HCC827-cellelinje blev etableret ud fra et lungeadenokarcinom og er kendetegnet ved at bære en aktiverende EGFR-exon 19-deletion (del E746-A750), som medfører høj følsomhed over for EGFR-tyrosinkinasehæmmere (TKI'er) såsom gefitinib, erlotinib og osimertinib. HCC827 er derfor en af de mest udbredte prækliniske modeller til undersøgelse af EGFR-drevet lungekræftbiologi, mekanismerne bag erhvervet TKI-resistens samt effektiviteten af næste generations målrettede terapier.

Den stabile luciferase-integration i HCC827-Luc muliggør følsom, kvantitativ bioluminescensbilleddannelse (BLI) af tumorbyrden i xenotransplantat- og ortotopiske lungetumormodeller hos immunkompromitterede værter. Det udsendte luminescenssignal korrelerer med antallet af levedygtige tumorceller, hvilket understøtter ikke-invasiv, langsgående overvågning af tumortransplantation, vækstkinetik, metastatisk spredning og terapeutisk respons. Dette gør HCC827-Luc særligt velegnet til evaluering af effektiviteten af EGFR-målrettede midler, kombinationsbehandlinger og strategier til reversering af resistens i prækliniske in vivo-miljøer.

HCC827-Luc bevarer de vigtigste molekylære og fænotypiske træk fra den oprindelige HCC827-linje, herunder status for EGFR-exon 19-deletion og følsomhed over for godkendte EGFR-hæmmere. Luciferase-modifikationen forbedrer den eksperimentelle følsomhed og gennemstrømningen væsentligt, hvilket muliggør farmakodynamiske vurderinger i realtid og letter både højkapacitets-lægemiddelscreening og mekanistiske undersøgelser af EGFR-signalvejsbiologien. Forskere bør verificere luciferaseaktivitet, EGFR-mutationsstatus og vækstkinetik under deres specifikke eksperimentelle betingelser inden anvendelse i kvantitativ billeddannelse eller farmakologiske studier.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom i lungerne

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC827-Luc (Cytion-katalognummer 305670)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase i 10 minutter ved 37 °C
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
39 år
Etnisk tilhørsforhold
Asiatisk