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HCC827-Luc
Tissue
Poumon
Disease
Adénocarcinome pulmonaire

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HCC827-Luc

Cell line · Product number 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

US$800.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

HCC827-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine HCC827 d’adénocarcinome pulmonaire, modifiée pour exprimer de manière stable un gène rapporteur de luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale HCC827 a été établie à partir d’un adénocarcinome pulmonaire et se distingue par la présence d’une délétion activatrice de l’exon 19 de l’EGFR (del E746-A750), qui lui confère une grande sensibilité aux inhibiteurs de la tyrosine kinase de l’EGFR (ITK) tels que le géfitinib, l’erlotinib et l’osimertinib. La lignée HCC827 est donc l’un des modèles précliniques les plus largement utilisés pour étudier la biologie du cancer du poumon induit par l’EGFR, les mécanismes de résistance acquise aux ITK et l’efficacité des thérapies ciblées de nouvelle génération.

L’intégration stable de la luciférase dans la lignée HCC827-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de tumeurs pulmonaires xénogreffées et orthotopiques chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe tumorale, de la cinétique de croissance, de la dissémination métastatique et de la réponse thérapeutique. Cela rend la lignée HCC827-Luc particulièrement adaptée à l’évaluation de l’efficacité des agents ciblant l’EGFR, des thérapies combinées et des stratégies de renversement de la résistance dans des contextes précliniques in vivo.

La lignée HCC827-Luc conserve les principales caractéristiques moléculaires et phénotypiques de la lignée parentale HCC827, notamment la présence d’une délétion de l’exon 19 de l’EGFR et la sensibilité aux inhibiteurs de l’EGFR approuvés. La modification par la luciférase améliore considérablement la sensibilité et le débit des expériences, permettant des évaluations pharmacodynamiques en temps réel et facilitant à la fois le criblage à haut débit de médicaments et les études mécanistiques de la biologie de la voie de l’EGFR. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le statut mutationnel de l’EGFR et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études d’imagerie quantitative ou pharmacologiques.

Tissue
Poumon
Disease
Adénocarcinome pulmonaire

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial

04Identifiers

Citation
HCC827-Luc (numéro de catalogue Cytion 305670)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase : 10 minutes à 37 °C
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Split ratio
1 à 3
Seeding density
de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
39 ans
Ethnicity
asiatique