Siirry sisältöön
HCC827-Luc
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen adenokarsinooma

Asiakirjat

HCC827-Luc

Cell line · Tuotenumero 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCC827-Luc on ihmisen HCC827-keuhkojen adenokarsinoomasolulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään vakaasti tulikärpäsen lusiferaasi-raportointigeeniä. Alkuperäinen HCC827-solulinja on peräisin keuhkojen adenokarsinoomasta, ja se erottuu siitä, että siinä on aktivoiva EGFR-eksonin 19 deleetio (del E746-A750), joka aiheuttaa suuren herkkyyden EGFR-tyrosiinikinaasi-inhibiittoreille (TKI:t), kuten gefitinibille, erlotinibi ja osimertinibi. HCC827 onkin yksi laajimmin käytetyistä prekliinisistä malleista, joilla tutkitaan EGFR:n ohjaamaa keuhkosyövän biologiaa, hankitun TKI-resistenssin mekanismeja sekä seuraavan sukupolven kohdennettujen hoitojen tehoa.

HCC827-Luc-solulinjan vakaa lusiferaasi-integraatio mahdollistaa herkän, kvantitatiivisen bioluminesenssikuvantamisen (BLI) kasvainkuormasta ksenotransplantaatti- ja ortotopisissa keuhkosyöpämalleissa immuunipuutteisissa isännissä. Lähetetty luminesenssisignaali korreloi elävien kasvainsolujen lukumäärän kanssa, mikä tukee kasvaimen kiinnittymisen, kasvukineettisen, metastaattisen leviämisen ja hoitovasteen ei-invasiivista pitkittäistutkimusta. Tämän ansiosta HCC827-Luc sopii erityisen hyvin EGFR:ään kohdistuvien lääkeaineiden, yhdistelmähoitojen ja resistenssin kumoamisstrategioiden tehokkuuden arviointiin prekliinisissä in vivo -olosuhteissa.

HCC827-Luc säilyttää emolinjan HCC827 keskeiset molekyyliset ja fenotyyppiset ominaisuudet, mukaan lukien EGFR-eksonin 19 deleetion ja herkkyyden hyväksytyille EGFR-estäjille. Lusiferaasimodifikaatio parantaa merkittävästi kokeiden herkkyyttä ja läpimenokapasiteettia, mahdollistaa reaaliaikaiset farmakodynaamiset arvioinnit sekä helpottaa sekä suurikapasiteettista lääkeaineiden seulontaa että EGFR-signalointireitin biologian mekanistisia tutkimuksia. Tutkijoiden tulee tarkistaa lusiferaasiaktiivisuus, EGFR-mutaatioiden tila ja kasvukineettiset ominaisuudet omissa kokeellisissa olosuhteissaan ennen käyttöä kvantitatiivisessa kuvantamisessa tai farmakologisissa tutkimuksissa.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCC827-Luc (Cytionin tuotenumero 305670)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase 10 minuuttia 37 °C:ssa
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
39 vuotta
Etnisyys
Aasialainen