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HCC827-Luc
Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma do pulmão

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HCC827-Luc

Cell line · Número do produto 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A HCC827-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana HCC827 de adenocarcinoma pulmonar, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental HCC827 foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma pulmonar e destaca-se por apresentar uma deleção ativadora no exão 19 do EGFR (del E746-A750), o que lhe confere elevada sensibilidade aos inibidores da tirosina quinase do EGFR (TKIs), tais como o gefitinib, erlotinibe e osimertinibe. A HCC827 é, por conseguinte, um dos modelos pré-clínicos mais amplamente utilizados para o estudo da biologia do cancro do pulmão induzido pelo EGFR, dos mecanismos de resistência adquirida aos TKI e da eficácia das terapias direcionadas de última geração.

A integração estável da luciferase no HCC827-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e quantitativas da carga tumoral em modelos de tumores pulmonares ortotópicos e de xenoenxertos em hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente emitido está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal não invasiva do enxerto tumoral, da cinética de crescimento, da disseminação metastática e da resposta terapêutica. Isto torna a linha HCC827-Luc particularmente adequada para avaliar a eficácia de agentes direcionados ao EGFR, terapias combinadas e estratégias de reversão da resistência em contextos pré-clínicos in vivo.

O HCC827-Luc mantém as principais características moleculares e fenotípicas da linha parental HCC827, incluindo o estado de deleção do exão 19 do EGFR e a sensibilidade a inibidores do EGFR aprovados. A modificação com luciferase aumenta substancialmente a sensibilidade e o rendimento experimental, permitindo avaliações farmacodinâmicas em tempo real e facilitando tanto o rastreio de fármacos de alto rendimento como as investigações mecanísticas da biologia da via do EGFR. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, o estado de mutação do EGFR e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização em estudos de imagiologia quantitativa ou farmacológicos.

Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma do pulmão

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
HCC827-Luc (número de catálogo da Cytion 305670)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase, 10 minutos a 37 °C
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
39 anos
Etnia
Asiático