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HCC827-Luc
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom der Lunge

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HCC827-Luc

Cell line · Artikelnummer 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HCC827-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen HCC827-Lungenadenokarzinom-Zelllinie, das so modifiziert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche HCC827-Zelllinie wurde aus einem Lungenadenokarzinom etabliert und zeichnet sich durch eine aktivierende EGFR-Exon-19-Deletion (del E746-A750) aus, die eine hohe Empfindlichkeit gegenüber EGFR-Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKIs) wie Gefitinib, Erlotinib und Osimertinib. HCC827 ist daher eines der am häufigsten verwendeten präklinischen Modelle zur Untersuchung der Biologie von EGFR-getriebenem Lungenkrebs, der Mechanismen der erworbenen TKI-Resistenz und der Wirksamkeit zielgerichteter Therapien der nächsten Generation.

Die stabile Integration der Luciferase in HCC827-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in Xenotransplantat- und orthotopen Lungentumormodellen bei immungeschwächten Wirten. Das emittierte Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so eine nichtinvasive Langzeitüberwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik, der Metastasierung und des Ansprechens auf die Therapie. Dadurch eignet sich HCC827-Luc besonders gut zur Bewertung der Wirksamkeit von EGFR-gerichteten Wirkstoffen, Kombinationstherapien und Strategien zur Resistenzumkehr in präklinischen In-vivo-Versuchen.

HCC827-Luc behält die wesentlichen molekularen und phänotypischen Merkmale der Elternlinie HCC827 bei, einschließlich des EGFR-Exon-19-Deletionsstatus und der Empfindlichkeit gegenüber zugelassenen EGFR-Inhibitoren. Die Luciferase-Modifikation erhöht die experimentelle Empfindlichkeit und den Durchsatz erheblich, ermöglicht pharmakodynamische Echtzeit-Bewertungen und erleichtert sowohl das Hochdurchsatz-Wirkstoffscreening als auch mechanistische Untersuchungen der Biologie des EGFR-Signalwegs. Forscher sollten die Luciferase-Aktivität, den EGFR-Mutationsstatus und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor der Verwendung in quantitativen Bildgebungs- oder pharmakologischen Studien überprüfen.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom der Lunge

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC827-Luc (Cytion-Katalognummer 305670)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Luc2 (Firefly, codonoptimiert)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase 10 Minuten bei 37 °C
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
39 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Asiatisch