HCC827-Luc
Cell line · Artikelnummer 305670
HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...
Anpassung / Empfehlungen
- HCC827-LucCell line€800.00
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
HCC827-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen HCC827-Lungenadenokarzinom-Zelllinie, das so modifiziert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche HCC827-Zelllinie wurde aus einem Lungenadenokarzinom etabliert und zeichnet sich durch eine aktivierende EGFR-Exon-19-Deletion (del E746-A750) aus, die eine hohe Empfindlichkeit gegenüber EGFR-Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKIs) wie Gefitinib, Erlotinib und Osimertinib. HCC827 ist daher eines der am häufigsten verwendeten präklinischen Modelle zur Untersuchung der Biologie von EGFR-getriebenem Lungenkrebs, der Mechanismen der erworbenen TKI-Resistenz und der Wirksamkeit zielgerichteter Therapien der nächsten Generation.
Die stabile Integration der Luciferase in HCC827-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in Xenotransplantat- und orthotopen Lungentumormodellen bei immungeschwächten Wirten. Das emittierte Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so eine nichtinvasive Langzeitüberwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik, der Metastasierung und des Ansprechens auf die Therapie. Dadurch eignet sich HCC827-Luc besonders gut zur Bewertung der Wirksamkeit von EGFR-gerichteten Wirkstoffen, Kombinationstherapien und Strategien zur Resistenzumkehr in präklinischen In-vivo-Versuchen.
HCC827-Luc behält die wesentlichen molekularen und phänotypischen Merkmale der Elternlinie HCC827 bei, einschließlich des EGFR-Exon-19-Deletionsstatus und der Empfindlichkeit gegenüber zugelassenen EGFR-Inhibitoren. Die Luciferase-Modifikation erhöht die experimentelle Empfindlichkeit und den Durchsatz erheblich, ermöglicht pharmakodynamische Echtzeit-Bewertungen und erleichtert sowohl das Hochdurchsatz-Wirkstoffscreening als auch mechanistische Untersuchungen der Biologie des EGFR-Signalwegs. Forscher sollten die Luciferase-Aktivität, den EGFR-Mutationsstatus und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor der Verwendung in quantitativen Bildgebungs- oder pharmakologischen Studien überprüfen.
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Adenokarzinom der Lunge
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelial
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HCC827-Luc (Cytion-Katalognummer 305670)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2063
05Expression und Anfälligkeit
- Antigenexpression
- Luc2 (Firefly, codonoptimiert)
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase 10 Minuten bei 37 °C
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 3
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 39 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Asiatisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
