HCC827-Luc
Cell line · Productnummer 305670
HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...
Maatwerk / Aanbevelingen
- HCC827-LucCell line€800.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
HCC827-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke HCC827-longadenocarcinoomcellijn, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke HCC827-cellijn is opgezet uit een longadenocarcinoom en valt op door de aanwezigheid van een activerende EGFR-exon-19-deletie (del E746-A750), die zorgt voor een hoge gevoeligheid voor EGFR-tyrosinekinaseremmers (TKI’s) zoals gefitinib, erlotinib en osimertinib. HCC827 is daarom een van de meest gebruikte preklinische modellen voor het bestuderen van de biologie van EGFR-gedreven longkanker, de mechanismen van verworven TKI-resistentie en de werkzaamheid van gerichte therapieën van de volgende generatie.
De stabiele integratie van luciferase in HCC827-Luc maakt gevoelige, kwantitatieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de tumorbelasting in xenotransplantaat- en orthotope longtumormodellen bij immuungecompromitteerde gastheren. Het uitgezonden luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat niet-invasieve longitudinale monitoring van tumorengraftment, groeikinetiek, metastatische verspreiding en therapeutische respons mogelijk maakt. Dit maakt HCC827-Luc bijzonder geschikt voor het evalueren van de werkzaamheid van EGFR-gerichte middelen, combinatietherapieën en strategieën voor het omkeren van resistentie in preklinische in-vivo-omgevingen.
HCC827-Luc behoudt de belangrijkste moleculaire en fenotypische kenmerken van de oorspronkelijke HCC827-lijn, waaronder de EGFR-exon-19-deletie en de gevoeligheid voor goedgekeurde EGFR-remmers. De luciferase-modificatie verhoogt de experimentele gevoeligheid en doorvoer aanzienlijk, waardoor realtime farmacodynamische beoordelingen mogelijk worden en zowel high-throughput-geneesmiddelenscreening als mechanistisch onderzoek naar de biologie van de EGFR-route worden vergemakkelijkt. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de EGFR-mutatiestatus en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens het te gebruiken in kwantitatieve beeldvorming of farmacologische studies.
- Weefsel
- Long
- Ziekte
- Longadenocarcinoom
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheel
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HCC827-Luc (Cytion-catalogusnummer 305670)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2063
05Expressie en vatbaarheid
- Antigeenexpressie
- Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase 10 minuten bij 37 °C
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 1 tot 3 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 39 jaar
- Etnische afkomst
- Aziatisch
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja
