Ga naar de inhoud
HCC827-Luc
Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom

Documenten

HCC827-Luc

Cell line · Productnummer 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HCC827-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke HCC827-longadenocarcinoomcellijn, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke HCC827-cellijn is opgezet uit een longadenocarcinoom en valt op door de aanwezigheid van een activerende EGFR-exon-19-deletie (del E746-A750), die zorgt voor een hoge gevoeligheid voor EGFR-tyrosinekinaseremmers (TKI’s) zoals gefitinib, erlotinib en osimertinib. HCC827 is daarom een van de meest gebruikte preklinische modellen voor het bestuderen van de biologie van EGFR-gedreven longkanker, de mechanismen van verworven TKI-resistentie en de werkzaamheid van gerichte therapieën van de volgende generatie.

De stabiele integratie van luciferase in HCC827-Luc maakt gevoelige, kwantitatieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de tumorbelasting in xenotransplantaat- en orthotope longtumormodellen bij immuungecompromitteerde gastheren. Het uitgezonden luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat niet-invasieve longitudinale monitoring van tumorengraftment, groeikinetiek, metastatische verspreiding en therapeutische respons mogelijk maakt. Dit maakt HCC827-Luc bijzonder geschikt voor het evalueren van de werkzaamheid van EGFR-gerichte middelen, combinatietherapieën en strategieën voor het omkeren van resistentie in preklinische in-vivo-omgevingen.

HCC827-Luc behoudt de belangrijkste moleculaire en fenotypische kenmerken van de oorspronkelijke HCC827-lijn, waaronder de EGFR-exon-19-deletie en de gevoeligheid voor goedgekeurde EGFR-remmers. De luciferase-modificatie verhoogt de experimentele gevoeligheid en doorvoer aanzienlijk, waardoor realtime farmacodynamische beoordelingen mogelijk worden en zowel high-throughput-geneesmiddelenscreening als mechanistisch onderzoek naar de biologie van de EGFR-route worden vergemakkelijkt. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de EGFR-mutatiestatus en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens het te gebruiken in kwantitatieve beeldvorming of farmacologische studies.

Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCC827-Luc (Cytion-catalogusnummer 305670)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase 10 minuten bij 37 °C
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
39 jaar
Etnische afkomst
Aziatisch