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HCC827-Luc
Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare

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HCC827-Luc

Cell line · Codice prodotto 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

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01Informazioni generali

Descrizione

HCC827-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare umana HCC827, derivata da un adenocarcinoma polmonare, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter della luciferasi di lucciola. La linea cellulare parentale HCC827 è stata ottenuta da un adenocarcinoma polmonare e si distingue per la presenza di una delezione attivante dell’esone 19 dell’EGFR (del E746-A750), che le conferisce un’elevata sensibilità agli inibitori della tirosin-chinasi dell’EGFR (TKI) quali gefitinib, erlotinib e osimertinib. L’HCC827 è quindi uno dei modelli preclinici più ampiamente utilizzati per lo studio della biologia del carcinoma polmonare guidato dall’EGFR, dei meccanismi di resistenza acquisita ai TKI e dell’efficacia delle terapie mirate di nuova generazione.

L’integrazione stabile della luciferasi in HCC827-Luc consente un’imaging bioluminescente (BLI) sensibile e quantitativo del carico tumorale in modelli di tumori polmonari xenotrapiantati e ortotopici in ospiti immunocompromessi. Il segnale luminescente emesso è correlato al numero di cellule tumorali vitali, consentendo il monitoraggio longitudinale non invasivo dell’attecchimento del tumore, della cinetica di crescita, della diffusione metastatica e della risposta terapeutica. Ciò rende HCC827-Luc particolarmente adatto alla valutazione dell’efficacia degli agenti mirati all’EGFR, delle terapie combinate e delle strategie di inversione della resistenza in contesti preclinici in vivo.

HCC827-Luc conserva le caratteristiche molecolari e fenotipiche chiave della linea parentale HCC827, tra cui lo stato di delezione dell’esone 19 dell’EGFR e la sensibilità agli inibitori dell’EGFR approvati. La modifica con la luciferasi migliora notevolmente la sensibilità e la produttività sperimentale, consentendo valutazioni farmacodinamiche in tempo reale e facilitando sia lo screening di farmaci ad alta produttività sia le indagini meccanicistiche sulla biologia della via dell’EGFR. I ricercatori dovrebbero verificare l’attività della luciferasi, lo stato di mutazione dell’EGFR e la cinetica di crescita nelle loro specifiche condizioni sperimentali prima dell’uso in studi di imaging quantitativo o farmacologici.

Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HCC827-Luc (codice catalogo Cytion 305670)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase per 10 minuti a 37 °C
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
39 anni
Etnia
Asiatico