Přejít na obsah
HCC827-Luc
Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom plic

Dokumenty

HCC827-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

HCC827-Luc je bioluminiscenční derivát lidské buněčné linie HCC827 pocházející z adenokarcinomu plic, který byl geneticky upraven tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie HCC827 byla izolována z adenokarcinomu plic a vyznačuje se přítomností aktivující delece v exonu 19 genu EGFR (del E746-A750), která jí propůjčuje vysokou citlivost na inhibitory tyrozinkinázy EGFR (TKI), jako jsou gefitinib, erlotinib a osimertinib. HCC827 je proto jedním z nejčastěji používaných předklinických modelů pro studium biologie rakoviny plic řízené EGFR, mechanismů získané rezistence vůči TKI a účinnosti cílených terapií nové generace.

Stabilní integrace luciferázy v HCC827-Luc umožňuje citlivé, kvantitativní bioluminiscenční zobrazování (BLI) nádorové zátěže v modelech xenotransplantátů a ortotopických plicních nádorů u imunokompromitovaných hostitelů. Vysílaný luminiscenční signál koreluje s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje neinvazivní longitudinální sledování přihojení nádoru, kinetiky růstu, šíření metastáz a terapeutické odezvy. Díky tomu je linie HCC827-Luc obzvláště vhodná pro hodnocení účinnosti látek zaměřených na EGFR, kombinovaných terapií a strategií zvrácení rezistence v předklinických in vivo podmínkách.

HCC827-Luc si zachovává klíčové molekulární a fenotypové vlastnosti mateřské linie HCC827, včetně statusu delece exonu 19 EGFR a citlivosti na schválené inhibitory EGFR. Modifikace luciferázou podstatně zvyšuje experimentální citlivost a propustnost, což umožňuje farmakodynamická hodnocení v reálném čase a usnadňuje jak vysoce propustný screening léčiv, tak mechanistické výzkumy biologie signální dráhy EGFR. Výzkumníci by měli před použitím v kvantitativním zobrazování nebo farmakologických studiích ověřit aktivitu luciferázy, stav mutace EGFR a růstovou kinetiku za svých specifických experimentálních podmínek.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom plic

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
HCC827-Luc (katalogové číslo Cytion 305670)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase 10 minut při 37 °C
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
39 let
Etnická příslušnost
Asijské