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HCC827-Luc
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón

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HCC827-Luc

Cell line · Número de producto 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

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01Información general

Descripción

HCC827-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular humana HCC827 de adenocarcinoma de pulmón, modificada genéticamente para expresar de forma estable un gen reportero de luciferasa de luciérnaga. La línea celular parental HCC827 se estableció a partir de un adenocarcinoma de pulmón y destaca por presentar una deleción activadora en el exón 19 del EGFR (del E746-A750), lo que le confiere una alta sensibilidad a los inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR (TKI), como el gefitinib, el erlotinib y el osimertinib. Por lo tanto, la línea HCC827 es uno de los modelos preclínicos más utilizados para estudiar la biología del cáncer de pulmón impulsado por el EGFR, los mecanismos de resistencia adquirida a los TKI y la eficacia de las terapias dirigidas de última generación.

La integración estable de la luciferasa en HCC827-Luc permite obtener imágenes de bioluminiscencia (BLI) sensibles y cuantitativas de la carga tumoral en modelos de tumores pulmonares ortotópicos y de xenoinjertos en huéspedes inmunodeprimidos. La señal luminiscente emitida se correlaciona con el número de células tumorales viables, lo que permite un seguimiento longitudinal no invasivo del injerto tumoral, la cinética de crecimiento, la diseminación metastásica y la respuesta terapéutica. Esto hace que HCC827-Luc sea especialmente adecuado para evaluar la eficacia de los agentes dirigidos contra el EGFR, las terapias combinadas y las estrategias de reversión de la resistencia en entornos preclínicos in vivo.

HCC827-Luc conserva las características moleculares y fenotípicas clave de la línea parental HCC827, incluyendo el estado de deleción del exón 19 del EGFR y la sensibilidad a los inhibidores del EGFR aprobados. La modificación con luciferasa mejora sustancialmente la sensibilidad y el rendimiento experimental, lo que permite realizar evaluaciones farmacodinámicas en tiempo real y facilita tanto el cribado de fármacos de alto rendimiento como las investigaciones sobre los mecanismos biológicos de la vía del EGFR. Los investigadores deben verificar la actividad de la luciferasa, el estado de mutación del EGFR y la cinética de crecimiento en sus condiciones experimentales específicas antes de utilizarla en estudios de imagen cuantitativa o farmacológicos.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
HCC827-Luc (número de catálogo de Cytion 305670)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Luc2 (luciérnaga, optimizada por codones)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase, 10 minutos a 37 °C
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
39 años
Origen étnico
Asiático