Tartalomra ugrás
HCC827-Luc
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő adenokarcinóma

Dokumentumok

HCC827-Luc

Cell line · Termékszám 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HCC827-Luc az emberi HCC827 tüdőadenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti HCC827 sejtvonalat tüdőadenokarcinómából állították elő, és az azzal jellemezhető, hogy aktiváló EGFR exon 19 deléciót (del E746-A750) hordoz, amely nagyfokú érzékenységet biztosít az EGFR-tirozin-kináz-gátlók (TKI-k) – például a gefitinib, az erlotinib és az osimertinib. Az HCC827 ezért az egyik legszélesebb körben használt preklinikai modell az EGFR-vezérelt tüdőrák biológiájának, a szerzett TKI-rezisztencia mechanizmusainak, valamint a következő generációs célzott terápiák hatékonyságának vizsgálatához.

A HCC827-Luc-ban található stabil luciferáz-integráció lehetővé teszi a tumorterhelés érzékeny, kvantitatív biolumineszcens képalkotását (BLI) xenotranszplantátum- és ortotópos tüdőtumor-modellekben immunhiányos gazdaszervezetekben. A kibocsátott lumineszcens jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami lehetővé teszi a tumor beültetésének, növekedési kinetikájának, metasztatikus terjedésének és a terápiás válaszra adott reakciójának nem invazív, longitudinális nyomon követését. Ezért az HCC827-Luc különösen alkalmas az EGFR-célzott szerek, a kombinációs terápiák és a rezisztencia-visszafordítási stratégiák hatékonyságának értékelésére preklinikai in vivo körülmények között.

Az HCC827-Luc megőrzi az eredeti HCC827 vonal legfontosabb molekuláris és fenotípusos jellemzőit, beleértve az EGFR 19. exonjának delécióját és a jóváhagyott EGFR-gátlók iránti érzékenységet. A luciferáz-módosítás jelentősen növeli a kísérleti érzékenységet és az átbocsátóképességet, lehetővé téve a valós idejű farmakodinamikai értékeléseket, valamint elősegítve mind a nagy átbocsátóképességű gyógyszerszűrést, mind az EGFR-útvonal biológiájának mechanisztikus vizsgálatait. A kutatóknak a kvantitatív képalkotásban vagy farmakológiai vizsgálatokban való felhasználás előtt ellenőrizniük kell a luciferáz-aktivitást, az EGFR-mutáció állapotát és a növekedési kinetikát a saját kísérleti körülményeik között.

Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő adenokarcinóma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
HCC827-Luc (Cytion katalógusszám: 305670)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase 10 percig 37 °C-on
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
39 év
Etnikai hovatartozás
Ázsiai