Pereiti prie turinio
HCC827-Luc
Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių adenokarcinoma

Dokumentai

HCC827-Luc

Cell line · Prekės numeris 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HCC827-Luc yra bioliuminescencinis žmogaus plaučių adenokarcinomos ląstelių linijos HCC827 darinys, genetiškai modifikuotas taip, kad stabiliai ekspresuotų jonvabalių liuciferazės reporterinį geną. Pirminė HCC827 ląstelių linija buvo sukurta iš plaučių adenokarcinomos ir išsiskiria tuo, kad joje yra aktyvuojanti EGFR 19-ojo eksono delecija (del E746-A750), kuri suteikia didelį jautrumą EGFR tirozino kinazės inhibitoriams (TKI), tokiems kaip gefitinibas, erlotinibo ir osimertinibo. Todėl HCC827 yra vienas iš plačiausiai naudojamų ikiklinikinių modelių, skirtų EGFR sukeltos plaučių vėžio biologijos, įgyto atsparumo TKI mechanizmų ir naujos kartos tikslinio gydymo veiksmingumo tyrimams.

Stabili liuciferazės integracija HCC827-Luc ląstelėse leidžia atlikti jautrų, kiekybinį bioluminescencinį vaizdavimą (BLI), vertinant naviko apimtį ksenotransplantatų ir ortotopinių plaučių navikų modeliuose imuninės sistemos susilpnėjusių šeimininkų organizmuose. Išskiriamas liuminescencinis signalas koreliuoja su gyvybingų naviko ląstelių skaičiumi, o tai leidžia neinvaziniu būdu stebėti naviko įsitvirtinimą, augimo kinetiką, metastazių plitimą ir atsaką į gydymą. Dėl to HCC827-Luc ypač tinka vertinti EGFR tikslinio poveikio preparatų, kombinuotų terapijų ir atsparumo panaikinimo strategijų veiksmingumą ikiklinikiniuose in vivo tyrimuose.

HCC827-Luc išlaiko pagrindines molekulinės ir fenotipines tėvinės HCC827 linijos savybes, įskaitant EGFR 19-ojo eksono delecijos statusą ir jautrumą patvirtintiems EGFR inhibitoriams. Luciferazės modifikacija žymiai padidina eksperimentinį jautrumą ir našumą, leidžia atlikti farmakodinaminius vertinimus realiuoju laiku bei palengvina tiek didelio našumo vaistų atranką, tiek EGFR kelio biologijos mechanizmų tyrimus. Prieš naudodami šią liniją kiekybiniams vaizdavimo ar farmakologiniams tyrimams, tyrėjai turėtų patikrinti luciferazės aktyvumą, EGFR mutacijų būklę ir augimo kinetiką savo konkrečiomis eksperimentinėmis sąlygomis.

Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių adenokarcinoma

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
HCC827-Luc (Cytion katalogo numeris 305670)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Luc2 (vabalas, kodonų optimizuotas)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
„Accutase“ 10 min. 37 °C temperatūroje
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
39 metai
Etninė priklausomybė
Azijos