Preskoči na vsebino
HCC827-Luc
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Pljučni adenokarcinom

Dokumenti

HCC827-Luc

Cell line · Številka izdelka 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

HCC827-Luc je bioluminiscenčni derivat človeške celične linije HCC827 za pljučni adenokarcinom, ki je bil genetsko spremenjen tako, da stabilno izraža reporterni gen luciferaze svetlečega hrošča. Izvorna celična linija HCC827 je bila vzpostavljena iz pljučnega adenokarcinoma in je znana po tem, da vsebuje aktivirajočo delecijo eksona 19 gena EGFR (del E746-A750), ki ji daje visoko občutljivost na zaviralce tirozinske kinaze EGFR (TKI), kot so gefitinib, erlotinib in osimertinib. HCC827 je zato eden najpogosteje uporabljanih predkliničnih modelov za preučevanje biologije pljučnega raka, ki ga povzroča EGFR, mehanizmov pridobljene odpornosti na TKI ter učinkovitosti ciljnih terapij naslednje generacije.

Stabilna integracija luciferaze v HCC827-Luc omogoča občutljivo, kvantitativno bioluminiscenčno slikanje (BLI) tumorske obremenitve v modelih ksenotransplantatov in ortotopnih pljučnih tumorjev pri imunokompromitiranih gostiteljih. Izsevan luminescenčni signal je v korelaciji s številom živih tumorskih celic, kar omogoča neinvazivno longitudinalno spremljanje vživetja tumorja, kinetične rasti, metastaziranja in terapevtskega odziva. Zaradi tega je linija HCC827-Luc še posebej primerna za ocenjevanje učinkovitosti zdravil, usmerjenih proti EGFR, kombiniranih terapij in strategij za preprečevanje odpornosti v predkliničnih in vivo razmerah.

HCC827-Luc ohranja ključne molekularne in fenotipne značilnosti izvorne linije HCC827, vključno s statusom delecije eksona 19 gena EGFR in občutljivostjo na odobrene zaviralce EGFR. Modifikacija z luciferazo bistveno izboljša eksperimentalno občutljivost in zmogljivost, kar omogoča farmakodinamične ocene v realnem času ter olajšuje tako visoko zmogljivo presejanje zdravil kot tudi mehanistične raziskave biologije poti EGFR. Raziskovalci morajo pred uporabo v kvantitativnih slikovnih ali farmakoloških študijah preveriti aktivnost luciferaze, status mutacije EGFR in kinetično rast v svojih specifičnih eksperimentalnih pogojih.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Pljučni adenokarcinom

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HCC827-Luc (kataloška številka Cytion 305670)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirana)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase 10 minut pri 37 °C
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
39 let
Etnična pripadnost
Azijski