Skip to content
HCC827-Luc
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה של הריאה

Documents

HCC827-Luc

Cell line · Product number 305670

HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCC827-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי HCC827 של אדנוקרצינומה ריאתית, שהונדס כך שיבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי HCC827 הוקם מתוך אדנוקרצינומה של הריאה, והוא ידוע בכך שהוא נושא מחיקה מפעילה באקסון 19 של EGFR (del E746-A750), המעניקה רגישות גבוהה למעכבי טירוזין קינאז של EGFR (TKIs) כגון גפיטיניב, ארלוטיניב ואוסימרטיניב. לפיכך, HCC827 הוא אחד המודלים הפרה-קליניים הנפוצים ביותר לחקר הביולוגיה של סרטן ריאה המונע על ידי EGFR, מנגנוני העמידות הנרכשת ל-TKI, ויעילותן של טיפולים ממוקדים מהדור הבא.

השילוב היציב של לוקיפרז ב-HCC827-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלי זרים (xenograft) וגידולים אורתוטופיים בריאות אצל מארחים בעלי מערכת חיסונית מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה, התפשטות גרורתית ותגובה טיפולית. דבר זה הופך את HCC827-Luc למתאים במיוחד להערכת היעילות של חומרים המכוונים ל-EGFR, טיפולים משולבים ואסטרטגיות להפחתת עמידות בסביבות פרה-קליניות in vivo.

HCC827-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים והפנוטיפיים המרכזיים של קו HCC827 ההורי, לרבות מצב המחיקה באקסון 19 של EGFR ורגישות למעכבי EGFR מאושרים. השינוי הגנטי של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את הרגישות והתפוקה הניסיונית, ומאפשר הערכות פרמקודינמיות בזמן אמת ומקל הן על סינון תרופות בתפוקה גבוהה והן על מחקרים מכניסטיים של הביולוגיה של מסלול ה-EGFR. על החוקרים לאמת את פעילות הלוקיפרז, את מצב המוטציה ב-EGFR ואת קינטיקת הצמיחה בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני השימוש בהדמיה כמותית או במחקרים פרמקולוגיים.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה של הריאה

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
HCC827-Luc (מספר קטלוג Cytion 305670)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2063

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase, 10 דקות בטמפרטורה של 37°C
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
39 שנים
Ethnicity
אסייתי