HCC827-Luc
Cell line · Product number 305670
HCC827-Luc is a bioluminescent derivative of the human HCC827 lung adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ge...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HCC827-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי HCC827 של אדנוקרצינומה ריאתית, שהונדס כך שיבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי HCC827 הוקם מתוך אדנוקרצינומה של הריאה, והוא ידוע בכך שהוא נושא מחיקה מפעילה באקסון 19 של EGFR (del E746-A750), המעניקה רגישות גבוהה למעכבי טירוזין קינאז של EGFR (TKIs) כגון גפיטיניב, ארלוטיניב ואוסימרטיניב. לפיכך, HCC827 הוא אחד המודלים הפרה-קליניים הנפוצים ביותר לחקר הביולוגיה של סרטן ריאה המונע על ידי EGFR, מנגנוני העמידות הנרכשת ל-TKI, ויעילותן של טיפולים ממוקדים מהדור הבא.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-HCC827-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלי זרים (xenograft) וגידולים אורתוטופיים בריאות אצל מארחים בעלי מערכת חיסונית מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה, התפשטות גרורתית ותגובה טיפולית. דבר זה הופך את HCC827-Luc למתאים במיוחד להערכת היעילות של חומרים המכוונים ל-EGFR, טיפולים משולבים ואסטרטגיות להפחתת עמידות בסביבות פרה-קליניות in vivo.
HCC827-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים והפנוטיפיים המרכזיים של קו HCC827 ההורי, לרבות מצב המחיקה באקסון 19 של EGFR ורגישות למעכבי EGFR מאושרים. השינוי הגנטי של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את הרגישות והתפוקה הניסיונית, ומאפשר הערכות פרמקודינמיות בזמן אמת ומקל הן על סינון תרופות בתפוקה גבוהה והן על מחקרים מכניסטיים של הביולוגיה של מסלול ה-EGFR. על החוקרים לאמת את פעילות הלוקיפרז, את מצב המוטציה ב-EGFR ואת קינטיקת הצמיחה בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני השימוש בהדמיה כמותית או במחקרים פרמקולוגיים.
- Tissue
- ריאה
- Disease
- אדנוקרצינומה של הריאה
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HCC827-Luc (מספר קטלוג Cytion 305670)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2063
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase, 10 דקות בטמפרטורה של 37°C
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 39 שנים
- Ethnicity
- אסייתי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
