LM/TK(LMTK-)

La lignée cellulaire LM/TK- (LMTK-) est dérivée de fibroblastes murins et se caractérise par l'absence d'activité thymidine kinase (TK). Cette lignée cellulaire est particulièrement utile dans la recherche en génétique et en biologie moléculaire, où elle sert de système modèle pour l'étude de la fonction des gènes, de la réplication de l'ADN et de la recombinaison. L'absence de TK dans ces cellules permet de sélectionner des mutants ou des cellules recombinantes qui ont retrouvé une activité TK, ce qui les rend précieuses dans les études impliquant des mutants déficients en TK et pour la sélection de clones TK-positifs après transfection avec de l'ADN exogène. Cette lignée cellulaire, dérivée d'une sous-ligne de la lignée cellulaire de fibroblastes de souris L-M qui est résistante à BUdR, est potentiellement utilisée pour des études génétiques et biochimiques telles que le transfert de gènes et l'hybridation de cellules somatiques. Les cellules LM/TK- sont couramment utilisées dans les recherches portant sur le gène de la thymidine kinase du virus de l'herpès simplex (HSV), car elles constituent un arrière-plan essentiel pour la sélection des transformants du gène HSV-TK. Ceci a des implications significatives dans la recherche sur la thérapie génique, où le HSV-TK est utilisé dans les stratégies de thérapie génique suicide pour tuer sélectivement les cellules cancéreuses. En outre, ces cellules sont utilisées dans la production de virus recombinants et dans l'analyse de l'expression et de la réplication des gènes viraux. La lignée cellulaire LMTK- joue donc un rôle essentiel dans l'avancement de notre compréhension de la manipulation génétique et le développement de stratégies thérapeutiques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie