Langsung ke isi
LM/TK(LMTK-)
Tisu
Jaringan Ikat Subkutan, Areola Mammae Dan Lemak
Sinonim
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Dokumen

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Nomor produk 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel LM/TK- (LMTK-) berasal dari fibroblas murin dan ditandai dengan kurangnya aktivitas timidin kinase (TK). Garis sel ini sangat berguna dalam penelitian biologi genetik dan molekuler, di mana ia berfungsi sebagai sistem model untuk mempelajari fungsi gen, replikasi DNA, dan rekombinasi. Tidak adanya TK dalam sel-sel ini memungkinkan pemilihan mutan atau sel rekombinan yang telah mendapatkan kembali aktivitas TK, menjadikannya berharga dalam penelitian yang melibatkan mutan yang kekurangan TK dan untuk pemilihan klon TK-positif setelah transfeksi dengan DNA eksogen. Garis sel ini, yang berasal dari sub-garis dari garis sel fibroblas tikus L-M yang resisten terhadap BUdR, berpotensi digunakan untuk penelitian genetik dan biokimia seperti transfer gen dan hibridisasi sel somatik. Sel LM/TK- biasanya digunakan dalam penelitian yang melibatkan gen timidin kinase virus herpes simpleks (HSV), karena sel ini memberikan latar belakang yang sangat penting untuk pemilihan transforman gen HSV-TK. Hal ini memiliki implikasi yang signifikan dalam penelitian terapi gen, di mana HSV-TK digunakan dalam strategi terapi gen bunuh diri untuk secara selektif membunuh sel kanker. Selain itu, sel-sel ini digunakan dalam produksi virus rekombinan dan dalam analisis ekspresi dan replikasi gen virus. Oleh karena itu, garis sel LMTK- memainkan peran penting dalam memajukan pemahaman kita tentang manipulasi genetik dan pengembangan strategi terapeutik.

Tisu
Jaringan Ikat Subkutan, Areola Mammae Dan Lemak
Sinonim
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti Fibroblast
Tumorigenik
Ya, pada tikus nude (Tumor berkembang dalam 21 hari dengan frekuensi 100% (5/5) pada tikus nude yang diinokulasi secara subkutan dengan 1×10⁷ sel).

04Pengidentifikasi

Referensi
LM/TK (LMTK-) (Nomor katalog Cytion 305176)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
H-2k

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C3H / An
Usia donor
100 hari