Gå til innholdet
LM/TK(LMTK-)
Vev
Subkutant bindevev, brystvorte og fett
Synonymer
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Dokumenter

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Produktnummer 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

LM/TK- (LMTK-) cellelinjen er avledet fra murine fibroblaster og kjennetegnes ved at den mangler tymidinkinase (TK)-aktivitet. Denne cellelinjen er spesielt nyttig i genetisk og molekylærbiologisk forskning, der den fungerer som et modellsystem for å studere genfunksjon, DNA-replikasjon og rekombinasjon. Fraværet av TK i disse cellene gjør det mulig å velge ut mutanter eller rekombinante celler som har fått tilbake TK-aktiviteten, noe som gjør dem verdifulle i studier som involverer TK-mangelfulle mutanter og for utvelgelse av TK-positive kloner etter transfeksjon med eksogent DNA. Denne cellelinjen, som er avledet fra en underlinje av L-M-musefibroblastcellelinjen som er resistent mot BUdR, kan potensielt brukes til genetiske og biokjemiske studier som genoverføring og somatisk cellehybridisering. LM/TK-celler brukes ofte i forskning som involverer herpes simplex-virusets (HSV) tymidinkinase-gen, ettersom de utgjør en viktig bakgrunn for seleksjon av HSV-TK-gen-transformanter. Dette har stor betydning for genterapiforskning, der HSV-TK brukes i selvmordsstrategier for genterapi for selektivt å drepe kreftceller. I tillegg brukes disse cellene i produksjon av rekombinante virus og i analyser av viralt genuttrykk og replikasjon. LMTK-cellelinjen spiller dermed en avgjørende rolle for vår forståelse av genmanipulering og utvikling av terapeutiske strategier.

Vev
Subkutant bindevev, brystvorte og fett
Synonymer
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast-lignende
Tumorinduserende
Ja, hos nakne mus (svulster utviklet seg innen 21 dager med 100 % frekvens (5/5) hos nakne mus som ble podet subkutant med 1×107 celler).

04Identifikatorer

Kildehenvisning
LM/TK(LMTK-) (Cytion-katalognummer 305176)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
H-2k

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C3H/An
Donorens alder
100 dager