LM/TK(LMTK-)

LM/TK- (LMTK-) cellelinjen stammer fra murine fibroblaster og er karakteriseret ved at mangle thymidinkinase (TK)-aktivitet. Denne cellelinje er særlig nyttig inden for genetisk og molekylærbiologisk forskning, hvor den fungerer som et modelsystem til undersøgelse af genfunktion, DNA-replikation og rekombination. Fraværet af TK i disse celler gør det muligt at udvælge mutanter eller rekombinante celler, der har genvundet TK-aktivitet, hvilket gør dem værdifulde i undersøgelser, der involverer TK-defekte mutanter og til udvælgelse af TK-positive kloner efter transfektion med eksogent DNA. Denne cellelinje, der stammer fra en underlinje af L-M musefibroblastcellelinjen, som er resistent over for BUdR, kan potentielt bruges til genetiske og biokemiske undersøgelser såsom genoverførsel og somatisk cellehybridisering. LM/TK-celler anvendes ofte i forskning, der involverer herpes simplex-virus (HSV)-tymidinkinase-genet, da de udgør en afgørende baggrund for udvælgelsen af HSV-TK-gen-transformanter. Det har stor betydning for genterapiforskning, hvor HSV-TK bruges i selvmordsstrategier for genterapi til selektivt at dræbe kræftceller. Desuden bruges disse celler til produktion af rekombinante vira og til analyse af viralt genudtryk og replikation. LMTK-cellelinjen spiller således en afgørende rolle i at fremme vores forståelse af genetisk manipulation og udviklingen af terapeutiske strategier.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring