Μετάβαση στο περιεχόμενο
LM/TK(LMTK-)
Ιστός
Υποδόριος συνδετικός ιστός, μαστική θηλή και λίπος
Συνώνυμα
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Έγγραφα

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά LM/TK- (LMTK-) προέρχεται από ινοβλάστες του ποντικού και χαρακτηρίζεται από έλλειψη δραστηριότητας κινάσης θυμιδίνης (TK). Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα χρήσιμη στη γενετική και μοριακή βιολογική έρευνα, όπου χρησιμεύει ως πρότυπο σύστημα για τη μελέτη της γονιδιακής λειτουργίας, της αντιγραφής του DNA και του ανασυνδυασμού. Η απουσία TK σε αυτά τα κύτταρα επιτρέπει την επιλογή μεταλλάξεων ή ανασυνδυασμένων κυττάρων που έχουν ανακτήσει τη δραστηριότητα TK, καθιστώντας τα πολύτιμα σε μελέτες που αφορούν μεταλλάξεις με ανεπάρκεια TK και για την επιλογή κλώνων θετικών στην TK μετά από διαμόλυνση με εξωγενές DNA. Αυτή η κυτταρική σειρά, που προέρχεται από μια υπο-γραμμή της κυτταρικής σειράς ινοβλαστών ποντικού L-M, η οποία είναι ανθεκτική στην BUdR, είναι δυνατόν να χρησιμοποιηθεί για γενετικές και βιοχημικές μελέτες, όπως η μεταφορά γονιδίων και ο υβριδισμός σωματικών κυττάρων. Τα κύτταρα LM/TK- χρησιμοποιούνται συνήθως σε έρευνες που αφορούν το γονίδιο της κινάσης της θυμιδίνης του ιού του απλού έρπητα (HSV), καθώς παρέχουν ένα κρίσιμο υπόβαθρο για την επιλογή μετασχηματιστών του γονιδίου HSV-TK. Αυτό έχει σημαντικές επιπτώσεις στην έρευνα γονιδιακής θεραπείας, όπου ο HSV-TK χρησιμοποιείται σε στρατηγικές γονιδιακής θεραπείας αυτοκτονίας για την επιλεκτική θανάτωση καρκινικών κυττάρων. Επιπλέον, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται στην παραγωγή ανασυνδυασμένων ιών και στην ανάλυση της έκφρασης και του πολλαπλασιασμού των ιικών γονιδίων. Η κυτταρική σειρά LMTK- διαδραματίζει έτσι κρίσιμο ρόλο στην προώθηση της κατανόησης της γενετικής χειραγώγησης και της ανάπτυξης θεραπευτικών στρατηγικών.

Ιστός
Υποδόριος συνδετικός ιστός, μαστική θηλή και λίπος
Συνώνυμα
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια (οι όγκοι αναπτύχθηκαν εντός 21 ημερών με συχνότητα 100% (5/5) σε γυμνά ποντίκια που εμβολιάστηκαν υποδόρια με 1×107 κύτταρα).

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
LM/TK (LMTK-) (αριθμός καταλόγου Cytion 305176)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_4536

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
H-2k

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C3H/An
Ηλικία δωρητή
100 ημέρες