LM/TK(LMTK-)

La línea celular LM/TK- (LMTK-) se deriva de fibroblastos murinos y se caracteriza por la ausencia de actividad de la timidina quinasa (TK). Esta línea celular es particularmente útil en la investigación en biología genética y molecular, donde sirve como sistema modelo para estudiar la función génica, la replicación del ADN y la recombinación. La ausencia de TK en estas células permite la selección de mutantes o células recombinantes que han recuperado la actividad de la TK, lo que las hace valiosas en estudios que involucran mutantes con deficiencia de TK y para la selección de clones positivos para TK tras la transfección con ADN exógeno. Esta línea celular, derivada de una sublínea de la línea de fibroblastos de ratón L-M que es resistente a la BUdR, se utiliza potencialmente para estudios genéticos y bioquímicos, tales como la transferencia génica y la hibridación de células somáticas. Las células LM/TK- se emplean comúnmente en investigaciones relacionadas con el gen de la timidina quinasa del virus del herpes simple (VHS), ya que proporcionan un sustrato crucial para la selección de transformantes del gen HSV-TK. Esto tiene implicaciones significativas en la investigación de la terapia génica, donde el HSV-TK se utiliza en estrategias de terapia génica suicida para eliminar selectivamente las células cancerosas. Además, estas células se utilizan en la producción de virus recombinantes y en el análisis de la expresión y replicación de genes virales. La línea celular LMTK- desempeña, por lo tanto, un papel fundamental en el avance de nuestro conocimiento sobre la manipulación genética y el desarrollo de estrategias terapéuticas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.