Skip to content
LM/TK(LMTK-)
Tissue
Mô liên kết dưới da, quầng vú và mỡ
Synonyms
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Documents

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Product number 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào LM/TK- (LMTK-) được phân lập từ tế bào sợi của chuột và đặc trưng bởi sự thiếu hụt hoạt động của thymidine kinase (TK). Dòng tế bào này đặc biệt hữu ích trong nghiên cứu di truyền và sinh học phân tử, nơi nó được sử dụng như một hệ thống mô hình để nghiên cứu chức năng gen, sao chép DNA và tái tổ hợp. Sự vắng mặt của TK trong các tế bào này cho phép lựa chọn các đột biến hoặc tế bào tái tổ hợp đã phục hồi hoạt động TK, làm cho chúng trở nên quý giá trong các nghiên cứu liên quan đến đột biến thiếu TK và cho việc lựa chọn các dòng TK dương tính sau khi chuyển gen ngoại lai. Dòng tế bào này, được phân lập từ một dòng con của dòng tế bào sợi chuột L-M kháng BUdR, có thể được sử dụng trong các nghiên cứu di truyền và sinh hóa như chuyển gen và lai tế bào soma. Tế bào LM/TK- thường được sử dụng trong nghiên cứu liên quan đến gen thymidine kinase của virus herpes simplex (HSV), vì chúng cung cấp nền tảng quan trọng cho việc chọn lọc các biến thể chuyển gen HSV-TK. Điều này có ý nghĩa quan trọng trong nghiên cứu liệu pháp gen, nơi gen HSV-TK được sử dụng trong các chiến lược liệu pháp gen tự sát để tiêu diệt chọn lọc các tế bào ung thư. Hơn nữa, các tế bào này được sử dụng trong sản xuất virus tái tổ hợp và phân tích biểu hiện gen và sao chép virus. Dòng tế bào LMTK- do đó đóng vai trò quan trọng trong việc nâng cao hiểu biết về thao tác gen và phát triển các chiến lược điều trị.

Tissue
Mô liên kết dưới da, quầng vú và mỡ
Synonyms
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude (U bướu phát triển trong vòng 21 ngày với tần suất 100% (5/5) ở chuột nude được tiêm dưới da với 1×10⁷ tế bào).

04Identifiers

Citation
LM/TK(LMTK-) (Số catalog Cytion 305176)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2k

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/An
Donor age
100 ngày