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LM/TK(LMTK-)
ティッシュ
皮下結合組織、乳腺乳輪、脂肪
同義語
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

LM/TK(LMTK-)

Cell line · 製品番号 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

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01概要

説明

LM/TK-(LMTK-)細胞株はマウス線維芽細胞に由来し、チミジンキナーゼ(TK)活性を持たないことが特徴である。この細胞株は、遺伝子機能、DNA複製、組換えを研究するモデル系として、遺伝学的、分子生物学的研究に特に有用である。この細胞ではTKが欠損しているため、TK活性を回復した変異体や組換え細胞を選択することができ、TK欠損変異体を含む研究や、外来性DNAによるトランスフェクション後のTK陽性クローンの選択に有用である。 この細胞株は、BUdRに耐性を持つL-Mマウス線維芽細胞株のサブラインに由来し、遺伝子導入や体細胞ハイブリダイゼーションなどの遺伝学的・生化学的研究に使用される可能性がある。LM/TK-細胞は単純ヘルペスウイルス(HSV)チミジンキナーゼ遺伝子を含む研究において、HSV-TK遺伝子形質転換体の選択に重要な背景を提供するため、一般的に採用されている。このことは、HSV-TKが癌細胞を選択的に死滅させる自殺遺伝子治療戦略で使用される遺伝子治療研究において重要な意味を持つ。さらに、これらの細胞は組換えウイルスの生産やウイルス遺伝子の発現と複製の解析にも利用されている。このようにLMTK-細胞株は、遺伝子操作と治療戦略の開発についての理解を深める上で重要な役割を果たしている。

ティッシュ
皮下結合組織、乳腺乳輪、脂肪
同義語
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスにおいて(1×10⁷個の細胞を皮下接種したヌードマウスでは、21日以内に100%の頻度(5/5)で腫瘍が発生した)。

04識別子

引用
LM/TK(LMTK-) (Cytion カタログ番号 305176)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_4536

05発現と感受性

抗原発現
H-2k

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C3H/An
ドナーの年齢
100日