Gå direkt till innehållet
LM/TK(LMTK-)
Vävnad
Subkutan bindväv, bröstvårtskörtlar och fett
Synonymer
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Produktnummer 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LM/TK- (LMTK-) cellinjen härrör från murina fibroblaster och kännetecknas av avsaknad av tymidinkinas (TK)-aktivitet. Denna cellinje är särskilt användbar inom genetisk och molekylärbiologisk forskning, där den fungerar som ett modellsystem för att studera genfunktion, DNA-replikation och rekombination. Frånvaron av TK i dessa celler möjliggör urval av mutanter eller rekombinanta celler som har återfått TK-aktivitet, vilket gör dem värdefulla i studier som involverar mutanter med TK-brist och för urval av TK-positiva kloner efter transfektion med exogent DNA. Denna cellinje, som härrör från en sublinje av musfibroblastcellinjen L-M som är resistent mot BUdR, kan potentiellt användas för genetiska och biokemiska studier såsom genöverföring och somatisk cellhybridisering. LM/TK-celler används vanligen i forskning som involverar herpes simplex-virusets (HSV) tymidinkinasgen, eftersom de utgör en viktig bakgrund för urvalet av HSV-TK-gentransformanter. Detta har betydande konsekvenser för genterapiforskning, där HSV-TK används i självmordsstrategier för genterapi för att selektivt döda cancerceller. Dessutom används dessa celler vid produktion av rekombinanta virus och vid analys av virala geners uttryck och replikation. LMTK-cellinjen spelar således en avgörande roll för att öka vår förståelse för genetisk manipulation och för utvecklingen av terapeutiska strategier.

Vävnad
Subkutan bindväv, bröstvårtskörtlar och fett
Synonymer
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast-liknande
Tumörframkallande
Ja, hos nakna möss (tumörer utvecklades inom 21 dagar med 100 % frekvens (5/5) hos nakna möss som injicerats subkutant med 1×107 celler).

04Identifierare

Källa
LM/TK(LMTK-) (Cytion katalognummer 305176)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
H-2k

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
C3H/An
Donatorns ålder
100 dagar