LM/TK(LMTK-)

La lignée cellulaire LM/TK- (LMTK-) est dérivée de fibroblastes murins et se caractérise par l’absence d’activité de la thymidine kinase (TK). Cette lignée cellulaire est particulièrement utile dans la recherche en biologie génétique et moléculaire, où elle sert de système modèle pour l’étude de la fonction des gènes, de la réplication de l’ADN et de la recombinaison. L’absence de TK dans ces cellules permet la sélection de mutants ou de cellules recombinantes ayant retrouvé une activité TK, ce qui les rend précieuses dans les études portant sur des mutants déficients en TK et pour la sélection de clones TK-positifs à la suite d’une transfection avec de l’ADN exogène. Cette lignée cellulaire, dérivée d’une sous-lignée de la lignée de fibroblastes de souris L-M résistante au BUdR, peut être utilisée pour des études génétiques et biochimiques telles que le transfert de gènes et l’hybridation de cellules somatiques. Les cellules LM/TK- sont couramment utilisées dans la recherche portant sur le gène de la thymidine kinase du virus de l’herpès simplex (HSV), car elles constituent un support essentiel pour la sélection de transformants du gène HSV-TK. Cela a des implications importantes dans la recherche en thérapie génique, où l’HSV-TK est utilisé dans des stratégies de thérapie génique suicidaire visant à détruire sélectivement les cellules cancéreuses. De plus, ces cellules sont utilisées dans la production de virus recombinants ainsi que dans l’analyse de l’expression et de la réplication des gènes viraux. La lignée cellulaire LMTK- joue donc un rôle essentiel dans l’avancement de notre compréhension de la manipulation génétique et dans l’élaboration de stratégies thérapeutiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.