LM/TK(LMTK-)

La linea cellulare LM/TK- (LMTK-) deriva da fibroblasti murini ed è caratterizzata dalla mancanza di attività della timidina chinasi (TK). Questa linea cellulare è particolarmente utile nella ricerca genetica e di biologia molecolare, dove serve come sistema modello per lo studio della funzione genica, della replicazione del DNA e della ricombinazione. L'assenza di TK in queste cellule permette di selezionare mutanti o cellule ricombinanti che hanno riacquistato l'attività TK, rendendole preziose negli studi che coinvolgono mutanti TK-deficienti e per la selezione di cloni TK-positivi in seguito alla trasfezione con DNA esogeno. Questa linea cellulare, derivata da una sotto-linea della linea cellulare di fibroblasti di topo L-M resistente alla BUdR, è potenzialmente utilizzabile per studi genetici e biochimici come il trasferimento genico e l'ibridazione di cellule somatiche. Le cellule LM/TK- sono comunemente impiegate nelle ricerche che riguardano il gene della timidina chinasi del virus dell'herpes simplex (HSV), in quanto forniscono uno sfondo cruciale per la selezione dei trasformanti del gene HSV-TK. Ciò ha implicazioni significative nella ricerca sulla terapia genica, dove HSV-TK viene utilizzato in strategie di terapia genica suicida per uccidere selettivamente le cellule tumorali. Inoltre, queste cellule sono utilizzate nella produzione di virus ricombinanti e nell'analisi dell'espressione e della replicazione dei geni virali. La linea cellulare LMTK svolge quindi un ruolo cruciale nel far progredire la nostra comprensione della manipolazione genetica e nello sviluppo di strategie terapeutiche.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia