Przejdź do treści
LM/TK(LMTK-)
Chusteczka
Podskórna tkanka łączna, otoczka sutkowa i tłuszcz
Synonimy
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Dokumenty

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Numer produktu 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa LM/TK- (LMTK-) pochodzi z mysich fibroblastów i charakteryzuje się brakiem aktywności kinazy tymidynowej (TK). Ta linia komórkowa jest szczególnie przydatna w badaniach genetycznych i biologii molekularnej, gdzie służy jako modelowy system do badania funkcji genów, replikacji DNA i rekombinacji. Brak TK w tych komórkach pozwala na selekcję mutantów lub komórek rekombinowanych, które odzyskały aktywność TK, co czyni je cennymi w badaniach obejmujących mutanty z niedoborem TK oraz do selekcji klonów TK-dodatnich po transfekcji egzogennym DNA. Ta linia komórkowa, pochodząca z podlinii linii komórkowej mysich fibroblastów L-M, która jest odporna na BUdR, jest potencjalnie wykorzystywana do badań genetycznych i biochemicznych, takich jak transfer genów i hybrydyzacja komórek somatycznych. Komórki LM/TK są powszechnie wykorzystywane w badaniach nad genem kinazy tymidynowej wirusa opryszczki pospolitej (HSV), ponieważ stanowią kluczowe tło dla selekcji transformantów genu HSV-TK. Ma to znaczące implikacje w badaniach nad terapią genową, gdzie HSV-TK jest wykorzystywany w strategiach samobójczej terapii genowej do selektywnego zabijania komórek nowotworowych. Ponadto, komórki te są wykorzystywane w produkcji rekombinowanych wirusów oraz w analizie ekspresji i replikacji genów wirusowych. Linia komórkowa LMTK odgrywa zatem kluczową rolę w pogłębianiu naszego zrozumienia manipulacji genetycznych i rozwoju strategii terapeutycznych.

Chusteczka
Podskórna tkanka łączna, otoczka sutkowa i tłuszcz
Synonimy
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy nagich (nowotwory rozwinęły się w ciągu 21 dni z częstotliwością 100% (5/5) u myszy nagich, którym podskórnie wstrzyknięto 1×107 komórek).

04Identyfikatory

Źródło
LM/TK(LMTK-) (numer katalogowy Cytion 305176)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
H-2k

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C3H/An
Wiek dawcy
100 dni