
- Doku
- Deri Altı Bağ Dokusu, Meme Areolası ve Yağ
- Eş anlamlılar
- L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)
Belgeler
LM/TK(LMTK-)
Cell line · Ürün numarası 305176
The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...
Kişiselleştirme / Öneriler
- LM/TK(LMTK-)Cell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
LM/TK- (LMTK-) hücre hattı, murin fibroblastlarından türetilmiştir ve timidin kinaz (TK) aktivitesinin olmaması ile karakterize edilir. Bu hücre dizisi özellikle genetik ve moleküler biyoloji araştırmalarında yararlı olup gen fonksiyonu, DNA replikasyonu ve rekombinasyonu incelemek için bir model sistem olarak hizmet vermektedir. Bu hücrelerde TK'nın bulunmaması, TK aktivitesini yeniden kazanmış mutantların veya rekombinant hücrelerin seçilmesine olanak tanıyarak, TK eksikliği olan mutantları içeren çalışmalarda ve eksojen DNA ile transfeksiyonu takiben TK-pozitif klonların seçilmesinde onları değerli kılar. BUdR'ye dirençli L-M fare fibroblast hücre hattının bir alt hattından türetilen bu hücre hattı, gen transferi ve somatik hücre hibridizasyonu gibi genetik ve biyokimyasal çalışmalar için potansiyel olarak kullanılır. LM/TK- hücreleri, HSV-TK gen transformantlarının seçimi için çok önemli bir arka plan sağladığından, herpes simpleks virüsü (HSV) timidin kinaz genini içeren araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bunun, HSV-TK'nın kanser hücrelerini seçici olarak öldürmek için intihar gen terapisi stratejilerinde kullanıldığı gen terapisi araştırmalarında önemli etkileri vardır. Ayrıca, bu hücreler rekombinant virüslerin üretiminde ve viral gen ekspresyonu ve replikasyonunun analizinde kullanılmaktadır. Bu nedenle LMTK hücre hattı, genetik manipülasyon anlayışımızın ilerletilmesinde ve terapötik stratejilerin geliştirilmesinde kritik bir rol oynamaktadır.
- Doku
- Deri Altı Bağ Dokusu, Meme Areolası ve Yağ
- Eş anlamlılar
- L-M[TK-]
- LM TK negative
- L-M (TK-)
- L M (TK-)
- LM(TK-)
- LM(tk-)
- LM-TK-
- LMTK-
- L cells (TK-)
- L(TK-)
- L(tk-)
02Sınıflandırma
- Canlı
- Fare
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Fibroblast Benzeri
- Tümör oluşturucu
- Evet, çıplak farelerde (1×107 hücre ile deri altına aşılanan çıplak farelerde 21 gün içinde %100 sıklıkla (5/5) tümörler gelişti).
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- LM/TK (LMTK-) (Cytion katalog numarası 305176)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4536
05İfade ve duyarlılık
- Antijen ekspresyonu
- H-2k
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Sıvı değişimi
- haftada 2 kez
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Tür / alt tür
- C3H/An
- Bağışçının yaşı
- 100 gün
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet