İçeriğe atla
LM/TK(LMTK-)
Doku
Deri Altı Bağ Dokusu, Meme Areolası ve Yağ
Eş anlamlılar
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Ürün numarası 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

LM/TK- (LMTK-) hücre hattı, murin fibroblastlarından türetilmiştir ve timidin kinaz (TK) aktivitesinin olmaması ile karakterize edilir. Bu hücre dizisi özellikle genetik ve moleküler biyoloji araştırmalarında yararlı olup gen fonksiyonu, DNA replikasyonu ve rekombinasyonu incelemek için bir model sistem olarak hizmet vermektedir. Bu hücrelerde TK'nın bulunmaması, TK aktivitesini yeniden kazanmış mutantların veya rekombinant hücrelerin seçilmesine olanak tanıyarak, TK eksikliği olan mutantları içeren çalışmalarda ve eksojen DNA ile transfeksiyonu takiben TK-pozitif klonların seçilmesinde onları değerli kılar. BUdR'ye dirençli L-M fare fibroblast hücre hattının bir alt hattından türetilen bu hücre hattı, gen transferi ve somatik hücre hibridizasyonu gibi genetik ve biyokimyasal çalışmalar için potansiyel olarak kullanılır. LM/TK- hücreleri, HSV-TK gen transformantlarının seçimi için çok önemli bir arka plan sağladığından, herpes simpleks virüsü (HSV) timidin kinaz genini içeren araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bunun, HSV-TK'nın kanser hücrelerini seçici olarak öldürmek için intihar gen terapisi stratejilerinde kullanıldığı gen terapisi araştırmalarında önemli etkileri vardır. Ayrıca, bu hücreler rekombinant virüslerin üretiminde ve viral gen ekspresyonu ve replikasyonunun analizinde kullanılmaktadır. Bu nedenle LMTK hücre hattı, genetik manipülasyon anlayışımızın ilerletilmesinde ve terapötik stratejilerin geliştirilmesinde kritik bir rol oynamaktadır.

Doku
Deri Altı Bağ Dokusu, Meme Areolası ve Yağ
Eş anlamlılar
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast Benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde (1×107 hücre ile deri altına aşılanan çıplak farelerde 21 gün içinde %100 sıklıkla (5/5) tümörler gelişti).

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
LM/TK (LMTK-) (Cytion katalog numarası 305176)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
H-2k

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C3H/An
Bağışçının yaşı
100 gün