
- Tissue
- רקמת חיבור תת-עורית, עטרה שדית ושומן
- Synonyms
- L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)
Documents
LM/TK(LMTK-)
Cell line · Product number 305176
The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים LM/TK- (LMTK-) נגזר מפיברובלסטים של עכברים ומאופיין בהיעדר פעילות של תיאמידין קינאז (TK). קו תאים זה שימושי במיוחד במחקר גנטי ומולקולרי, שם הוא משמש כמערכת מודל לחקר תפקוד גנים, שכפול DNA ורקומבינציה. היעדר TK בתאים אלה מאפשר בחירה של מוטנטים או תאים רקומביננטיים שהשיבו לעצמם את פעילות ה-TK, מה שהופך אותם לבעלי ערך במחקרים העוסקים במוטנטים חסרי TK ובבחירת שיבוטים חיוביים ל-TK לאחר טרנספקציה עם DNA אקסוגני. קו תאים זה, שמקורו בקו משנה של קו תאי פיברובלסט L-M של עכברים העמיד ל-BUdR, משמש פוטנציאלית למחקרים גנטיים וביוכימיים כגון העברת גנים והכלאה של תאים סומטיים. תאי LM/TK- משמשים בדרך כלל במחקרים העוסקים בגן התימידין קינאז של נגיף הרפס סימפלקס (HSV), שכן הם מספקים רקע חיוני לבחירת טרנספורמנטים של גן HSV-TK. לכך יש השלכות משמעותיות במחקר בתחום הטיפול הגנטי, שבו HSV-TK משמש באסטרטגיות טיפול גנטי התאבדותי להריגת תאים סרטניים באופן סלקטיבי. בנוסף, תאים אלה משמשים בייצור נגיפים רקומביננטיים ובניתוח של ביטוי גנים נגיפיים ושכפולם. קו התאים LMTK ממלא אפוא תפקיד קריטי בקידום ההבנה שלנו בנושא מניפולציה גנטית ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות.
- Tissue
- רקמת חיבור תת-עורית, עטרה שדית ושומן
- Synonyms
- L-M[TK-]
- LM TK negative
- L-M (TK-)
- L M (TK-)
- LM(TK-)
- LM(tk-)
- LM-TK-
- LMTK-
- L cells (TK-)
- L(TK-)
- L(tk-)
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי פיברובלסט
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים (גידולים התפתחו תוך 21 יום בתדירות של 100% (5/5) בעכברים עירומים שהוחדר להם תת-עורית 1×107 תאים).
04Identifiers
- Citation
- LM/TK(LMTK-) (מספר קטלוגי Cytion 305176)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4536
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- H-2k
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- פעמיים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/An
- Donor age
- 100 ימים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes