
- Tkáň
- Podkožní pojivová tkáň, prsní areola a tuk
- Synonyma
- L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)
Dokumenty
LM/TK(LMTK-)
Cell line · Číslo výrobku 305176
The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...
Přizpůsobení / Doporučení
- LM/TK(LMTK-)Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie LM/TK- (LMTK-) je odvozena z myších fibroblastů a vyznačuje se absencí aktivity tymidinkinázy (TK). Tato buněčná linie je zvláště užitečná v genetickém a molekulárně biologickém výzkumu, kde slouží jako modelový systém pro studium funkce genů, replikace DNA a rekombinace. Nepřítomnost TK v těchto buňkách umožňuje výběr mutantů nebo rekombinantních buněk, které znovu získaly aktivitu TK, což je cenné pro studie zahrnující mutanty s deficitem TK a pro výběr klonů s pozitivní TK po transfekci exogenní DNA. Tato buněčná linie, odvozená z podlinie buněčné linie myších fibroblastů L-M, která je rezistentní vůči BUdR, se potenciálně používá pro genetické a biochemické studie, jako je přenos genů a hybridizace somatických buněk. LM/TK-buňky se běžně používají ve výzkumu zahrnujícím gen pro tymidinkinázu viru herpes simplex (HSV), protože poskytují klíčové pozadí pro výběr transformantů genu HSV-TK. To má významné důsledky ve výzkumu genové terapie, kde se HSV-TK používá ve strategiích sebevražedné genové terapie k selektivnímu zabíjení nádorových buněk. Dále se tyto buňky využívají při výrobě rekombinantních virů a při analýze exprese a replikace virových genů. Buněčná linie LMTK- tak hraje zásadní roli v rozvoji našeho chápání genetické manipulace a vývoji terapeutických strategií.
- Tkáň
- Podkožní pojivová tkáň, prsní areola a tuk
- Synonyma
- L-M[TK-]
- LM TK negative
- L-M (TK-)
- L M (TK-)
- LM(TK-)
- LM(tk-)
- LM-TK-
- LMTK-
- L cells (TK-)
- L(TK-)
- L(tk-)
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Fibroblastům podobné
- Tumorogenní
- Ano, u nahých myší (nádory se vyvinuly do 21 dnů se 100% četností (5/5) u nahých myší, kterým bylo podkožně naočkováno 1×107 buněk).
04Identifikátory
- Citace
- LM/TK(LMTK-) (katalogové číslo Cytion 305176)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4536
05Exprese a náchylnost
- Exprese antigenu
- H-2k
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Obnova tekutin
- 2krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- C3H/An
- Věk dárce
- 100 dní
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano