Pereiti prie turinio
LM/TK(LMTK-)
Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, krūties areolė ir riebalai
Sinonimai
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Dokumentai

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Prekės numeris 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

LM/TK- (LMTK-) ląstelių linija yra kilusi iš pelės fibroblastų ir pasižymi tuo, kad neturi timidinkinazės (TK) aktyvumo. Ši ląstelių linija ypač naudinga genetiniuose ir molekulinės biologijos tyrimuose, kur ji naudojama kaip modelinė sistema genų funkcijai, DNR replikacijai ir rekombinacijai tirti. Dėl TK nebuvimo šiose ląstelėse galima atrinkti mutantus arba rekombinantines ląsteles, kuriose TK aktyvumas yra atkurtas, todėl jos yra vertingos atliekant tyrimus, susijusius su TK stokojančiais mutantais, ir atrenkant TK teigiamus klonus po transfekcijos egzogenine DNR. Šią ląstelių liniją, gautą iš L-M pelių fibroblastų ląstelių linijos, kuri yra atspari BUdR, galima naudoti genetiniams ir biocheminiams tyrimams, pavyzdžiui, genų perkėlimui ir somatinių ląstelių hibridizacijai. LM/TK- ląstelės paprastai naudojamos atliekant tyrimus, susijusius su herpes simplekso viruso (HSV) timidino kinazės genu, nes jos yra labai svarbus fonas HSV-TK genų transformantams atrinkti. Tai turi didelę reikšmę genų terapijos tyrimams, kai HSV-TK naudojamas savižudiškos genų terapijos strategijose, siekiant selektyviai sunaikinti vėžines ląsteles. Be to, šios ląstelės naudojamos gaminant rekombinantinius virusus ir analizuojant virusų genų raišką bei replikaciją. Taigi LMTK- ląstelių linija atlieka svarbų vaidmenį gerinant mūsų supratimą apie genetines manipuliacijas ir kuriant terapines strategijas.

Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, krūties areolė ir riebalai
Sinonimai
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogosiose pelėse (navikai išsivystė per 21 dieną 100 % dažniu (5/5) nuogosiose pelėse, kurioms po oda buvo įskiepytos 1×107 ląstelės).

04Identifikatoriai

Nuoroda
LM/TK(LMTK-) (Cytion katalogo numeris 305176)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
H-2k

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C3H/An
Donoro amžius
100 dienų