LM/TK(LMTK-)

A linha celular LM/TK- (LMTK-) é derivada de fibroblastos murinos e caracteriza-se pela ausência de atividade da timidina quinase (TK). Esta linha celular é particularmente útil na investigação em genética e biologia molecular, onde serve de sistema modelo para estudar a função dos genes, a replicação do ADN e a recombinação. A ausência de TK nestas células permite a seleção de mutantes ou células recombinantes que recuperaram a atividade de TK, o que as torna valiosas em estudos que envolvem mutantes deficientes em TK e para a seleção de clones TK-positivos após transfecção com ADN exógeno. Esta linha celular, derivada de uma sub-linhagem da linha celular de fibroblastos de ratinho L-M que é resistente à BUdR, é potencialmente utilizada para estudos genéticos e bioquímicos, como a transferência de genes e a hibridação de células somáticas. As células LM/TK- são habitualmente utilizadas em investigação que envolve o gene da timidina quinase do vírus do herpes simplex (HSV), uma vez que constituem um fundo crucial para a seleção de transformantes do gene HSV-TK. Isto tem implicações significativas na investigação da terapia genética, em que o HSV-TK é utilizado em estratégias de terapia genética suicida para matar seletivamente células cancerígenas. Além disso, estas células são utilizadas na produção de vírus recombinantes e na análise da expressão e replicação de genes virais. A linha celular LMTK- desempenha assim um papel fundamental no avanço da nossa compreensão da manipulação genética e no desenvolvimento de estratégias terapêuticas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia