Ga naar de inhoud
LM/TK(LMTK-)
Weefsel
Onderhuids bindweefsel, tepelhof en vet
Synoniemen
L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)

Documenten

LM/TK(LMTK-)

Cell line · Productnummer 305176

The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De LM/TK- (LMTK-) cellijn is afgeleid van muizenfibroblasten en wordt gekenmerkt door het ontbreken van thymidinekinase (TK)-activiteit. Deze cellijn is vooral nuttig in genetisch en moleculair biologisch onderzoek, waar het dient als modelsysteem voor het bestuderen van genfunctie, DNA-replicatie en recombinatie. De afwezigheid van TK in deze cellen maakt de selectie mogelijk van mutanten of recombinante cellen die weer TK-activiteit hebben, waardoor ze waardevol zijn in studies met TK-deficiënte mutanten en voor de selectie van TK-positieve klonen na transfectie met exogeen DNA. Deze cellijn, afgeleid van een sublijn van de L-M-muisfibroblastcellijn die resistent is tegen BUdR, kan mogelijk worden gebruikt voor genetische en biochemische studies zoals genoverdracht en somatische celhybridisatie. LM/TK-cellen worden vaak gebruikt in onderzoek waarbij het herpes simplex virus (HSV) thymidinekinase gen betrokken is, omdat ze een cruciale achtergrond vormen voor de selectie van HSV-TK gen-transformanten. Dit heeft belangrijke implicaties voor gentherapie-onderzoek, waarbij HSV-TK wordt gebruikt in zelfmoord-gentherapiestrategieën om kankercellen selectief te doden. Bovendien worden deze cellen gebruikt bij de productie van recombinante virussen en bij de analyse van virale genexpressie en replicatie. De LMTK-cellijn speelt dus een cruciale rol in het bevorderen van ons begrip van genetische manipulatie en de ontwikkeling van therapeutische strategieën.

Weefsel
Onderhuids bindweefsel, tepelhof en vet
Synoniemen
  • L-M[TK-]
  • LM TK negative
  • L-M (TK-)
  • L M (TK-)
  • LM(TK-)
  • LM(tk-)
  • LM-TK-
  • LMTK-
  • L cells (TK-)
  • L(TK-)
  • L(tk-)

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Tumorverwekkend
Ja, bij naakte muizen (tumoren ontwikkelden zich binnen 21 dagen met een frequentie van 100% (5/5) bij naakte muizen die subcutaan werden geïnoculeerd met 1×107 cellen).

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
LM/TK (LMTK-) (Cytion catalogusnummer 305176)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4536

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
H-2k

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C3H/An
Leeftijd van de donor
100 dagen