
- Weefsel
- Onderhuids bindweefsel, tepelhof en vet
- Synoniemen
- L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-)
Documenten
LM/TK(LMTK-)
Cell line · Productnummer 305176
The LM/TK- (LMTK-) cell line is derived from murine fibroblasts and is characterized by the lack of thymidine kinase (TK) activity. This cell line is part...
Maatwerk / Aanbevelingen
- LM/TK(LMTK-)Cell line€430.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
De LM/TK- (LMTK-) cellijn is afgeleid van muizenfibroblasten en wordt gekenmerkt door het ontbreken van thymidinekinase (TK)-activiteit. Deze cellijn is vooral nuttig in genetisch en moleculair biologisch onderzoek, waar het dient als modelsysteem voor het bestuderen van genfunctie, DNA-replicatie en recombinatie. De afwezigheid van TK in deze cellen maakt de selectie mogelijk van mutanten of recombinante cellen die weer TK-activiteit hebben, waardoor ze waardevol zijn in studies met TK-deficiënte mutanten en voor de selectie van TK-positieve klonen na transfectie met exogeen DNA. Deze cellijn, afgeleid van een sublijn van de L-M-muisfibroblastcellijn die resistent is tegen BUdR, kan mogelijk worden gebruikt voor genetische en biochemische studies zoals genoverdracht en somatische celhybridisatie. LM/TK-cellen worden vaak gebruikt in onderzoek waarbij het herpes simplex virus (HSV) thymidinekinase gen betrokken is, omdat ze een cruciale achtergrond vormen voor de selectie van HSV-TK gen-transformanten. Dit heeft belangrijke implicaties voor gentherapie-onderzoek, waarbij HSV-TK wordt gebruikt in zelfmoord-gentherapiestrategieën om kankercellen selectief te doden. Bovendien worden deze cellen gebruikt bij de productie van recombinante virussen en bij de analyse van virale genexpressie en replicatie. De LMTK-cellijn speelt dus een cruciale rol in het bevorderen van ons begrip van genetische manipulatie en de ontwikkeling van therapeutische strategieën.
- Weefsel
- Onderhuids bindweefsel, tepelhof en vet
- Synoniemen
- L-M[TK-]
- LM TK negative
- L-M (TK-)
- L M (TK-)
- LM(TK-)
- LM(tk-)
- LM-TK-
- LMTK-
- L cells (TK-)
- L(TK-)
- L(tk-)
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Fibroblast-achtige
- Tumorverwekkend
- Ja, bij naakte muizen (tumoren ontwikkelden zich binnen 21 dagen met een frequentie van 100% (5/5) bij naakte muizen die subcutaan werden geïnoculeerd met 1×107 cellen).
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- LM/TK (LMTK-) (Cytion catalogusnummer 305176)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4536
05Expressie en vatbaarheid
- Antigeenexpressie
- H-2k
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- C3H/An
- Leeftijd van de donor
- 100 dagen
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja